視床下部、下垂体ホルモン遺伝子転写関連因子の単離とその機能解析

下丘脑和垂体激素基因转录相关因子的分离及其功能分析

• 批准号: 08877162
• 负责人: 臼井 健
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: International Institute for Advanced Studies
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877162/
• 关键词: 内分泌; 転写調節; 酵母two-hybrid法; Pit-1; 下垂体; 転写関連因子; 酵母Two-hybrid法; 視床下部

我々は内分泌組織における、ホルモン遺伝子の発現調節機構を検討するために、その遺伝子発現、およびその転写調節にかかわる因子群の単離を目指してきた。近年の研究で転写に関わる因子の多数ありその全容は以前考えられていたものよりはるかに複雑であることが明らかになってきた。本研究では、下垂体の発生、分化にとって重要な因子でありまた同時に成熟下垂体において成長ホルモン、プロラクチン、TSH遺伝子の転写調節因子であるPit-1の転写調節に関与する因子の単離を試みた。方法は酵母two-hybridシステムを用いてヒトPit-1をbaitとしてヒト胎児脳のライブラリーをスクリーニングした。その結果得られた陽性クローンのうち一つはin vivo,in vitroのいずれにおいても、Pit-1との特異的な相互作用を有していた。またその組織分布をNorthern blotにて検討するとこの遺伝子は下垂体を含めた広い組織においてその発現を認めた。またRT-PCR法においては、下垂体腫瘍においてもその発現を認めたが腫瘍の内分泌的な性格との相関は明らかでなかった。またこの因子のPit-1転写活性化能に与える影響を検討したところ、この因子そのものは転写活性化能を有しないがPit-1の転写活性化能を更に増強させることが明らかになった。以上のことよりこの因子が下垂体においてPit-1による転写調節に対してcoactivaterとして機能していることが考えられる。

我们的目的是隔离基因表达和其转录调节中涉及的因素组，以研究内分泌组织中激素基因表达的机理。最近的研究表明，转录涉及许多因素，并且其中的整个因素比以前想象的要复杂得多。在这项研究中，我们试图隔离成熟的垂体中的生长激素，催乳素和TSH基因的PIT-1的转录调控因子，这是垂体发育和分化的重要因素，以及同时。该方法是使用Human Pit-1作为诱饵使用酵母双杂交系统来筛选人类胎儿大脑的库。由此产生的阳性克隆与体内和体外都有特定的相互作用。此外，当通过Northern印迹检查组织分布时，该基因在包括垂体在内的各种组织中表达。此外，RT-PCR方法还表明，该肿瘤在垂体肿瘤中也表达，但与肿瘤内分泌个性的相关性尚不清楚。此外，当我们研究该因素对PIT-1转录激活能力的影响时，发现该因素本身没有转录激活能力，但进一步增强了PIT-1的转录激活能力。从以上，可以认为该因子是垂体中PIT-1转录调控转录调控的共激活因子。