細胞周期制御因子p21が糖尿病性膵β細胞障害に関わる可能性の検討

细胞周期调节因子p21参与糖尿病胰腺β细胞损伤的可能性研究

• 批准号: 11877188
• 负责人: 山崎 義光
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877188/
• 关键词: p21; 酸化ストレス; 2型糖尿病; 膵β細胞障害; インスリン生合成; アデノウイルス

昨年までの研究により、糖尿病の発症・進展に起因する酸化ストレスの誘導に伴って、膵ラ氏島における細胞周期制御因子p21(cyclin dependent kinase Inhibitor)の発現量が増加することが示された。加えてこれがインスリン遺伝子発現低下にも関与することが示唆された。本年度はさらに多面的にβ細胞におけるp21発現誘導の影響を解析するため、p21遺伝子を組み込んだ組換えアデノウイルスベクターを大量に作製し、培養β細胞株に感染させてp21遺伝子を効率よく発現させることにした。p21遺伝子を組み込んだ組換えアデノウイルスの作製にあたっては、当初は従来のCOS-TPC法(Miyake,S et al.:Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1993)を用いた。比較的低力価ながら得られたp21発現adenovirusを培養膵島細胞に感染させたところ、インスリンの生合成低下が認められ、糖尿病状態で増加するp21が2型糖尿病に伴うインスリン生合成低下に関わることが示された。さらに、より高力価なウイルスを得るべく、現在、p21遺伝子を組み込んだ組換え遺伝子アデノウイルスDNAをin vitro ligation反応により予め作製し、HEK293細胞にtransfectionして増殖させるという新しい手法(Mizuguchi,H.＆ Kay,M.A.:Hum.Gene Ther.1998)を試みている。

Last year's research showed an increase in the production of cyclin dependent kinase inhibitor p21(cyclin dependent kinase Inhibitor), a cell cycle inhibitor associated with the induction of ACTH in the development and progression of diabetes mellitus. Add the following information to the list: This year, we analyzed the effects of p21 gene expression on the induction of multi-faceted β-cell infection. We also analyzed the effects of p21 gene expression on the induction of p21 gene expression. p21 COS-TPC method (Miyake,S et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993). Compared with the low level of p21 expression in cultured islet cells, the low level of p21 expression in cultured islet cells is associated with the low level of p21 expression in type 2 diabetes. The p21 gene was isolated from HEK 293 cells and then transformed into HEK293 cells. The p21 gene was isolated from HEK293 cells and then transformed into HEK293 cells. Kay,M.A.: Hum.Gene Ther. 1998).

项目成果

Fujitani Y, et al.: "Identification of a portable repression domain and an E1A-responsive activation domain on pax4 : a possible role of pax4 as a transcriptional repressor in the pancreas"Molecular and Cellular Biology. 19(12). 8281-8291 (1999)

Fujitani Y 等人：“pax4 上便携式抑制结构域和 E1A 响应激活结构域的识别：pax4 作为胰腺中转录抑制因子的可能作用”分子和细胞生物学。

Fujitani Y.et al.: "Identification of a portable repression domain and an ELA-responsive activation domain on pax4: a possible role of pax4 as a transcriptional repressor in the pancreas"Molecular and Cellular Biology. 19(12). 8281-8291 (1999)

Fujitani Y.等人：“鉴定 pax4 上的便携式抑制结构域和 ELA 响应激活结构域：pax4 作为胰腺转录抑制因子的可能作用”分子和细胞生物学。

Kaneto H, et al.: "Oxidative stress induces p21 expression in pancreatic islet cells : possible implication in beta-cell dysfunction"Diabetologia. 42(9). 1093-1097 (1999)

Kaneto H 等人：“氧化应激诱导胰岛细胞中的 p21 表达：可能与 β 细胞功能障碍有关”Diabetologia。

Sakamoto K, et al.: "Identification of oxidative stress-regulated genes in rat aortic smooth muscle cells by suppression in subtractive hybrization"FEBS Letters. 461. 47-51 (1999)

Sakamoto K 等人：“通过消减杂交抑制来鉴定大鼠主动脉平滑肌细胞中的氧化应激调节基因”FEBS Letters。

Kajimoto Y, et al.: "Induction of glycation suppresses glucokinase gene expression in HIT-T15 cells"Diabetologia. 42(12). 1417-1424 (1999)

Kajimoto Y 等人：“糖基化的诱导抑制 HIT-T15 细胞中的葡萄糖激酶基因表达”Diabetologia。