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胎児中脳培養細胞より分化増殖させたドーパミン神経を用いたパーキンソン病への脳移植

使用从培养的胎儿中脑细胞分化和增殖的多巴胺神经元进行脑移植治疗帕金森病

基本信息

批准号：
11877241
负责人：
田代弦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

1.先ず前段階の作業として未分化幼若細胞をドーパミン細胞へと誘導分化させる物質:活性型sonic hedgehog(SHH-N)を遺伝子導入したラットグリア細胞(A1細胞)を作成した。2.次にこのA1細胞とのco-cultureにより、胎児中脳未分化細胞がドーパミン細胞へと分化増殖していくかの検証をin vitroで行った。胎生11日目のラット胎児中脳未分化分散細胞をA1細胞とco-cultureしたA1群と、単独で播いたC群とに分け、ドーパミン産生細胞のマーカーであるtyrosine hydroxylase(TH)に対する抗体で免疫組織化学染色した。(1)A1群では3〜4日目でTH免疫陽性細胞が樹状突起を出し、神経細胞へと成長しながら細胞塊(cluster)を形成し始め、その数・大きさは共にC群に比して有意に増加した。(2)7日目以降にはTH免疫陽性を示すclusterは、お互いに密な線維連絡を取り合うほど神経としての形態を獲得してきたのに対し、C群では線維連絡は殆ど認められなかった。3.この結果は、未分化幼若細胞である早期胎児神経細胞や神経幹細胞をこのA1細胞とco-cultureした後に移植することにより、パーキンソン病に対する外科的治療としてのドーパミン産生細胞の脳内移植に、新たな、しかも豊富なdonor細胞を供給できる可能性を示した。さらに、現存のドーパミン産生細胞の移植に、A1細胞をco-graftすることにより、移植効果の増大をも期待させるものである。

1. The first step of the process is to introduce an active sonic hedgehog(SHH-N) into undifferentiated immature cells (A1 cells). 2. In addition, A1 cells and undifferentiated cells in the fetus were cultured in vitro. On the 11th day of life, undifferentiated and scattered cells in the fetus were identified by immunohistochemical staining for cytosine hydroxylase(TH) in A1 cells and co-culture in C cells. (1)A1 3 ~ 4 days later, TH immunopositive cells formed dendrites, neurons grew, and cell clusters began to form. The number of TH immunopositive cells increased significantly compared with C clusters. (2)7 In order to reduce TH immune positive, cluster, mutual dense linear contact, combination, mental state, acquisition, C group, linear contact, recognition, recognition, 3. These results demonstrate the possibility of transplantation of undifferentiated embryonic cells and A1 cells after co-culture and surgical treatment of undifferentiated embryonic cells and donor cells. In the future, the transplantation of existing cells, the co-graft of A1 cells, the growth of transplanted cells, and the expectation of future generations will be discussed.