ヒト細胞周期G2期チェックポイント解析

人体细胞周期G2期检查点分析

• 批准号: 11878141
• 负责人: 河邉 拓己
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878141/
• 关键词: チェックポイント; HRAD9; WeelHV; 細胞周期; ヒト; G2期; 癌治療; ペプチド; Chk1; Chk2

我々は、癌および細胞の分子生物学的解析結果により、大多数のヒト癌細胞が、癌細胞として成り立つために、効率良く突然変異を蓄積する必要性から、細胞周期G1期のチェックポイントを欠損していることに着目した。抗癌剤/放射線/温熱療法/紫外線などによりDNAに障害を受けると、正常細胞は主に細胞周期G1期に(G1チェックポイント)、また、癌細胞は細胞周期G2期に(G2チェックポイント)停止し、傷害を修復して生存するという違いがある。そこで我々は、細胞周期G2チェックポイントを阻害することにより、選択的に癌細胞を破壊することが出来ると考え、G2チェックポイントのシグナル伝達系の解析を試みた。そこで、DNA傷害を感知する蛋白群のなかで、最も最初に同定されたHRAD9の、ヒト大腸癌株HCT116での体細胞ノックアウトを試みた。その結果、ノックアウト細胞は生存できなく解析が不可能だったが、ヘテロの状態では、DNA傷害後にG2期に停止しにくくなっていることが明らかになり、HRAD9の細胞周期G2期チェックポイントへの関与が示唆された。この他、DNA傷害シグナル伝達経内の燐酸化酵素Chk1/Chk2を阻害する合成ペプチドを設計し、選択的な細胞周期G2チェックポイント阻害を世界で初めて成功するとともに、それにより、正常細胞への副作用無く、癌細胞特異的に抗癌剤などDNA傷害性の処置に対する感受性を増強できることを培養細胞およびヌードマウスを用いて実験的に証明する事に成功した。

I 々 は, cancer お よ の び cell molecular biology analysis results に よ り, most の ヒ ト cancer が, cancer cells と し て made into り つ た め に, good working rate く suddenly - different を accumulation す る necessity か ら, cell cycle G1 phase の チ ェ ッ ク ポ イ ン ト を owe loss し て い る こ と に with mesh し た. Anti-cancer tonic/uv/warm/radiation therapy な ど に よ り に handicap of DNA を by け る と, normal cells は に に cell cycle G1 phase (G1 チ ェ ッ ク ポ イ ン ト), ま た, cancer cells は cell cycle G2 に (G2 チ ェ ッ ク ポ イ ン ト) stop し and repair damage を し て survival す る と い い う spare が あ る. そ こ で I 々 は, cell cycle G2 チ ェ ッ ク ポ イ ン ト を resistance against す る こ と に よ り, sentaku に cancer を broken 壊 す る こ と が out る と え test, G2 チ ェ ッ ク ポ イ ン ト の シ グ ナ ル 伝 da is の parsing を try み た. そ こ で, DNA damage を perception す る protein group の な か で, most も に initially be さ れ た HRAD9 の, ヒ ト HCT116 colorectal cancer strain で の somatic ノ ッ ク ア ウ ト を try み た. そ の results, ノ ッ ク ア ウ は ト cell survival で き な く parsing が impossible だ っ た が, ヘ テ ロ の state で は, DNA damage after に G2 に stop し に く く な っ て い る こ と が Ming ら か に な り, HRAD9 の cell cycle G2 チ ェ ッ ク ポ イ ン ト へ の masato and が in stopping さ れ た. こ の he, DNA damage シ グ ナ ル 伝 within reach 経 の 燐 acidification enzyme Chk1 / Chk2 を resistance against す る synthetic ペ プ チ ド を design し, sentaku な cell cycle G2 チ ェ ッ ク ポ イ ン ト resistance against を め the early で す て success る と と も に, そ れ に よ り, normal cells へ の side effects without く, cancer specific に anti-cancer tonic な ど DNA damage の 処 buy に す seaborne る susceptibility を raised strong で き る こ と を culture cell お よ び ヌ ー ド マ ウ ス を with い て be 験 に prove す る matter に success し た.

项目成果

手塚俊文 他: "Inhibition of Nuclear Factor-kB-mediated Transcription by Association with the Amino-terminal Enhancer of Split,a Groucho-・・・"The Journal of Biological Chemistry. 275・6. 4383-4390 (2000)

Toshifumi Tezuka 等人：“通过与 Split 的氨基末端增强子（Groucho-...）结合来抑制核因子-kB 介导的转录”，《生物化学杂志》275・6（2000 年）。

菅沼正司 他: "Sensitization of cancer cells to DNA damage-induced cell death by specific cell cycle G2 chechipoint abrogation"Cancer Research. 59. 5887-5891 (1999)

Masashi Suganuma 等：“通过特定细胞周期 G2 chechipoint 废除使癌细胞对 DNA 损伤诱导的细胞死亡敏感”，癌症研究 59. 5887-5891 (1999)。

楊建平 他: "NF-kB subunit p65 binds 53BP2 and inhibits cell death induced by 53BP2"Oncogene. 18. 5177-5186 (1999)

杨建平等人：“NF-kB 亚基 p65 结合 53BP2 并抑制 53BP2 诱导的细胞死亡”Oncogene 18. 5177-5186 (1999)。

河邊拓己 他: "環境因子と細胞周期"蛋白質核酸酵素. 44・15. 2501-2506 (1999)

Takumi Kawabe 等：“环境因素和细胞周期”蛋白质核酸酶 44・15（1999）。

岡本尚 他: "Antioxidant and redox regulation of genes"Academic Press Inc.. (2000)

Takashi Okamoto 等人：“基因的抗氧化和氧化还原调节”Academic Press Inc. (2000)