カルシウム透過型グルタミン酸受容体で誘導される可塑性遺伝子群の同定とその発現機構

钙渗透性谷氨酸受体诱导的可塑性基因的鉴定及其表达机制

基本信息

  • 批准号:
    00J02280
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

昨年度までに、AMPA受容体の活性化によって生じる転写因子CREBのリン酸化には、Ca^<2+>結合蛋白の一つであるcalbindin-D28kの核移行が必要であることを明らかにしてきた。アデノウィルスベクターを用いて「Ca^<2+>透過型AMPA受容体(GluR2Q)」および「calbindin-D28k、CB-GFP(核移行能欠失型calbindin-D28k)またはGFP(コントロール)」を各種細胞株へ共発現させ、AMPA/cyclothiazide刺激によって生じる細胞内Ca^<2+>動態をfura-2イメージング法により解析した。GFP共発現群と比較して、calbindin-D28k共発現群で有意にAMPA受容体を介した細胞内へのCa^<2+>流入量が増加することを見出した。この増加はCB-GFP共発現群においても観察されたことから、細胞質に存在するcalbindin-D28kによる効果であることが示唆された。このCa^<2+>流入量の増加は機能受容体数の増加に起因するとの仮説を立て、AMPA受容体の細胞外領域認識抗体を用いた免疫染色および細胞膜表面蛋白のビオチン標識法を用いたウェスタンブロットにより、細胞膜表面上に存在するAMPA受容体の定量を試みた。calbindin-D28kまたはCB-GFPの共発現によりCa^<2+>透過型AMPA受容体の細胞膜表面上における発現が有意に増加することを見出した。一方、Ca^<2+>非透過型AMPA受容体の発現には影響を及ぼさなかった。以上の結果から、calbindin-D28kは核における転写因子活性化の制御に加え、細胞質においては受容体の細胞内動態を規定する機能を有することが明らかとなった。そしてこのデュアル機能により、calbindin-D28kはAMPA受容体を介した情報伝達に寄与している可能性が示唆された。
Yesterday's annual ま で に の activeness, AMPA, let body に よ っ て raw じ る planning write factor after CREB の リ ン acidification に は, Ca ^ 2 + > < binding protein の a つ で あ る calbindin D28k - の nuclear migration が necessary で あ る こ と を Ming ら か に し て き た. ア デ ノ ウ ィ ル ス ベ ク タ ー を with い て "Ca ^ 2 + < > type through AMPA by let body (GluR2Q)" お よ び "calbindin D28k, CB GFP (nuclear migration can owe lost calbindin D28k) ま た は GFP (コ ン ト ロ ー ル)" を all kinds of cell lines へ 発 now total さ せ, AM PA/cyclothiazide stimulus に よ っ て raw じ る intracellular Ca ^ 2 + > < dynamic を fura - 2 イ メ ー ジ ン グ method に よ り parsing し た. GFP 発 now group total と compare し て and calbindin D28k - 発 group now で intentionally に AMPA を interface by let body し た intracellular へ の Ca ^ 2 + > < inflow が raised plus す る こ と を shows し た. こ の raised は requirement by CB - GFP 発 now group total に お い て も 観 examine さ れ た こ と か ら, cytoplasm に す る calbindin D28k - に よ る unseen fruit で あ る こ と が in stopping さ れ た. こ の Ca ^ 2 + < > inflow の raised plus は function by let body count の raised and cause に す る と の said 仮 を made て, AMPA, let body antibody を の extracellular domain knowledge with い た immune dyeing お よ び membrane surface protein の ビ オ チ ン を identification method using い た ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト に よ り に exists, the cell membrane surface す る AMPA let body quantitative を の Try みた. Calbindin D28k - ま た は CB - GFP の 発 now total に よ り Ca ^ 2 + < > type through AMPA の membrane surface by let body に お け る 発 now が intentionally に raised す る こ と を shows し た. One side, the Ca^<2+> non-permeable AMPA is affected by the current に に of the capacitors を and ぼさな った った. の above results か ら, calbindin D28k は nuclear に お け る planning write factor activeness の suppression に え, cytoplasm に お い て は let body の cell dynamic を rules す る function を have す る こ と が Ming ら か と な っ た. そ し て こ の デ ュ ア ル function に よ り, calbindin D28k は AMPA を interface by let body し た intelligence 伝 da に send し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kondo M, Miwa A, Okado H: "NUCLEAR TRANSLOCATION OF CALBINDIN-D28K REGULATES AMPA RECEPTOR-DEPENDENT CREB PHOSPHORYLATION IN CORTICAL NEURONS"Axon Guidance & Neural Plasticity (Abstract of papers presented at the 2002 CSHL meeting). 116 (2002)
Kondo M、Miwa A、Okado H:“CALBINDIN-D28K 的核转位调节皮质神经元中 AMPA 受体依赖性 CREB ​​磷酸化”轴突指导
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
近藤真啓, 岡戸晴生: "Ca^<2+>透過型AMPA受容体とCa^<2+>結合蛋白の機能連関"医学のあゆみ. 202. 1017-1022 (2002)
Masaki Kondo、Haruo Okado:“Ca^2+-传递 AMPA 受体与 Ca^2+-结合蛋白之间的功能关系”医学史 202. 1017-1022 (2002)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kondo M, Miwa A, Okado H: "Roles of calbindin-D28k for cell surface expression of AMPA receptors"Jpn. J. Physiol.. 52. S117 (2002)
Kondo M、Miwa A、Okado H:“calbindin-D28k 对 AMPA 受体细胞表面表达的作用”Jpn。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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