有機カチオントランスポータを介した薬物排泄機構の分子・細胞生物学的研究

有机阳离子转运蛋白介导的药物排泄机制的分子和细胞生物学研究

• 批准号: 00J02646
• 负责人: 浦上 裕美子
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J02646/
• 关键词: 薬物排泄; 有機カチオントランスポータ; クローニング; スプライシングバリアント; 薬物認識特性; クレアチニン; GFR

腎尿細管に発現する有機カチオントランスポータ(OCT)は、塩基性薬物や不要代謝物の尿細管分泌を担っている。本研究では、hOCT2を中心としたヒト有機カチオントランスポータ群の基質認識特性、並びに腎機能の指標であるクレアチニンの輸送に対するhOCT2の関与について検討した。ヒト腎cDNAライブラリーから、hOCT2のスプライシングバリアントであるhOCT2-A cDNAの単離に成功した。hOCT2-Aは483個のアミノ酸からなり、hOCT2と81%のアミノ酸相同性を示した。hOCT2-A mRNAは腎に強く発現すること、弱いながらも骨髄、精巣や胎盤などにも発現が認められた。hOCT2及びhOCT2-Aのカチオン性薬物に対する親和性は、hOCT2-AはhOCT2に比べて多くのカチオン性薬物に対し高親和性であることが判明した。以上の結果から、hOCT2-AはhOCT2と異なった薬物認識特性をもつ高親和性の新規有機カチオントランスポータであり、カチオン性薬物腎動態の多様性を担うこと明らかにした。糸球体濾過量(GFR)は腎機能の重要な指標であり、クレアチニンクリアランス(Ccr)が評価方法として汎用されている。しかし、クレアチニンの腎排泄は糸球体濾過だけでなく尿細管分泌も関与するため、Ccrが実際のGFRより高くなることが指摘されている。尿細管上皮細胞におけるクレアチニンの輸送に有機イオン輸送系の関与が示唆されてきたが、その分子的実体については未解明であった。本研究によって、ヒト腎における側底膜側からのクレアチニン取り込みにhOCT2が関与することを初めて明らかにすることができた。さらに、hOCT2を介したクレアチニン取り込みは、シメチジンやトリメトプリムなど、種々カチオン性薬物によって阻害されることを見出した。これらの結果は、Ccrを用いたGFRの正確な評価方法を確立する上で極めて有用な情報である。

Renal tubule production of organic compounds and metabolites in urine tubule secretion This study investigated the relationship between hOCT2 and renal function, including matrix cognitive characteristics and renal function. hOCT2-A cDNA isolation was successful. hOCT2-A shows 483 samples with acid identity, hOCT2 shows 81% with acid identity. hOCT2-A mRNA is strongly expressed in the kidney and weakly expressed in the placenta. hOCT2 and hOCT2-A have higher affinity than hOCT2 and hOCT2-A. The above results show that hOCT2-A has a high affinity for the recognition of different biological characteristics, and the new organic model has a high affinity for the recognition of different biological characteristics. GFR is an important indicator of renal function. The kidney excretes the kidney, the kidney filters the kidney, the kidney excretes the kidney. The relationship between urine epithelial cells and organic transport system is still unclear. This study was conducted on the side of the kidney and the bottom membrane. In addition, hOCT2 can also be used to detect and detect the presence of a variety of substances. The results of this study are very useful information for establishing the correct evaluation method for GFR.

项目成果

浦上裕美子: "薬物腎排泄に関わる有機カチオントランスポータ(OCT)の分子的多様性"薬学雑誌. 122(11). 957-965 (2002)

Yumiko Urakami：“参与肾脏药物排泄的有机阳离子转运蛋白 (OCT) 的分子多样性”，Pharmaceutical Journal 122(11) 957-965 (2002)。

Urakami, Y.: "cDNA cloning, functional characterization, and tissue distribution of an alternatively spliced variant of organic cation transporter hOCT2 predominantly expressed in the human kidney"Journal of the American Society of Nephrology. 13(7). 1703

Urakami, Y.：“主要在人肾中表达的有机阳离子转运蛋白 hOCT2 的选择性剪接变体的 cDNA 克隆、功能表征和组织分布”美国肾脏病学会杂志。

Motohashi, H.: "Gene expression levels and immunolocalization of organic ion transporters in the human kidney"Journal of the American Society of Nephrology. 13(4). 866-874 (2002)

Motohashi, H.：“人类肾脏中有机离子转运蛋白的基因表达水平和免疫定位”美国肾脏病学会杂志。