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高次ミトコンドリア核を形成する新規タンパク質による1ゲノム遺伝子セットの発現制御

由形成高阶线粒体核的新型蛋白质调节一个基因组基因组的表达

基本信息

批准号：
00J07667
负责人：
東山成江 (佐々木成江)
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Ochanomizu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J07667/
关键词：
ミトコンドリア核 DNA-タンパク質複合体ヒストン様タンパク質

项目摘要

本研究の目的は、DNA-タンパク質複合体の高次構造レベルでの複製・転写の制御機構を明らかにすることである。私は、ミトコンドリアDNAとタンパク質の高次構造体であるミトコンドリア核をモデルとして用い、解析をおこなってきた。これまでに、ミトコンドリア核の高次構造の形成に重要であるヒストンH1とHMGタンパク質の両者の性質を併せ持った新規タンパク質を真正粘菌から発見し、Glomと名づけた。このタンパク質は、ミトコンドリアDNA全長に渡って結合し、ミトコンドリアゲノム全遺伝子の機能制御に関わっていると考えられる。現在、ミトコンドリア核に含まれる他の構造タンパク質についても同様に解析を進め、包括的な理解を目指している。新規ミトコンドリア核タンパク質の同定以前まで使用していた単離ミトコンドリア核様体には、ミトコンドリア内膜の一部が混入していることがわかっていた。そこで、ミトコンドリア核様体を構成するタンパク質を効率よく同定するために単離法を再検討した。その結果、単離ミトコンドリア核様体を再び界而活性剤NP-40で処理することにより内膜の除去されたミトコンドリア核様体を単離することに成功した。この単離ミトコンドリア核様体を使用し、DNA-セファロースカラムやDNaseなどを用いた解析によりDNA結合タンパク質を調べた。その結果、56kDa、36kDa、34kDaがDNA結合能があることが分かった。それらのタンパク質のN末端アミノ酸配列をペプチドシークエンスにより決定した結果、すべて新規タンパク質であることが分かった。現在、ペプチドマッピングを行い内部アミノ酸配列を調べている。

The purpose of this study is to clarify the mechanism of replication and transcription in the higher-order structure of DNA-protein complexes. A higher-order structure of DNA and DNA can be used for analysis. The formation of high-order structures in the core is important, and the properties of high-order structures in the core are important. The DNA sequence of this gene is related to the functional control of the DNA sequence. Now, the core of the system contains other structural elements, such as the analysis of the same, including the understanding of the target. The new regulation is used before the quality of the core is determined. The composition of the core is discussed in detail. The results showed that the separation of the core from the active NP-40 was successful. The DNA binding protein was analyzed by DNA sequencing and DNA sequencing. DNA binding energy: 56kDa, 36kDa, 34kDa. The N-terminal amino acid sequence of the protein is determined by the sequence of amino acids. Now, select the appropriate configuration for the internal configuration.