リン脂質分解酵素ホスホリパーゼD(PLD)の生理的役割の解析

磷脂降解酶磷脂酶D（PLD）的生理作用分析

• 批准号: 00J10225
• 负责人: 野上 真宏
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J10225/
• 关键词: ホスホリパーゼP; ラッフル膜; EGF; Rac1; 細胞生物学; 細胞内シグナリング

上皮増殖因子(EGF)受容体(EGFR)から、細胞運動に重要なラッフル膜形成に至るシグナル伝津メカニズムは不明である。EGFRはその活性化に伴い、細胞質領域の5つのチロシン残基(Y)が自己リン酸化され、下流シグナルを伝達する。そこでこれら5つのYに変異を導入したEGFRを用いてラッフル膜形成に必要なYの同定を試みた結果、992番目のY(Y992)がラッフル膜形成に必要であった。また、リン酸化Y992(pY992)を認識して結合する分子として同定されているホスホリパーゼCγ1(PLCγ1)のEGF刺激によるラッフル膜形成への関与について解析した。内在性PLCγ1の細胞内局在を解析したところ、EGF刺激によりPLCγ1は、pY992依存的に形成されたラッフル膜にEGFRと共局在した。EGF刺激によるラッフル膜形成は、ドミナントネガティブPLCγ1変異体PLCγ1およびPLC活性阻害剤のいずれによっても阻害された。以上の結果から、PLCγ1はEGF刺激によるラッフル膜形成に関与することが明らかとなった。また、EGF刺激を介したラッフル膜形成において中心的役割を果たすことが報告されている低分子量GTP結合蛋白質のRac1がpY992およびPLCγ1によって仲介される経路においても役割を果たすかについて解析した。EGF刺激によるRac1の活性化は、PLC活性阻害剤により阻害された。また、ドミナントネガティブRac1変異体によってpY992依存性ラッフル膜形成は阻害された。以上の結果からRac1変異体の活性化は、pY922およびPLCγ1によって仲介されるラッフル膜形成シグナリングにおいても役割を果たすことが明らかとなった。また、EGFRの自己リン酸化を介さない、CrkIIが仲介するEGF依存性ラッフル膜形成シグナリングについても同様に解析したところ、この経路においてもRac1の活性化が必要であることが明らかとなった。

Epithelial colonization factor (EGF) receptor (EGFR) and cell motility are important in the formation of membrane. EGFR activates the companion, the cell field, the residue (Y), the acidizing agent, and the vulgar enzyme. In this paper, the results of the test results were used to determine the results of the test results, the results of the experiment, the results of the test results, and the results of the Y992 (pY992) was acidified and acidified. The molecules were linked to the same molecular weight. C γ 1 (PLC γ 1) was stimulated by EGF. The formation of membrane was detected and analyzed. The intracellular localization of endogenous PLC gamma 1 receptor, EGF stimulation, PLC gamma 1, pY992-dependent formation, membrane EGFR co-location. EGF stimulated the formation of membrane, the formation of membrane, the growth of PLC γ 1, the body PLC γ 1, the activity of PLC, the inhibition of PLC activity, the formation of membrane, the formation of membrane and the formation of membrane. The above results showed that PLC γ 1 EGF stimulation significantly affected the formation of membranes and the formation of membranes. In this study, EGF stimulates the formation of the membrane in the center of the plant, and reports that the low molecular weight GTP binding protein, Rac1, pY992, PLC gamma 1, mediates, mediates, and clears the fruit in service. EGF stimulates the activation of Rac1, and the activity of PLC inhibits the activity of DNA. The formation of the membrane is blocked by the formation of the membrane, which is closely related to the Rac1 dependence of the pY992. The above results show that Rac1 is active, pY922 is sensitive to PLC gamma 1, and that the membrane is formed. For example, EGFR, EGFR, acidify, introduce, CrkII, intermediary, EGF dependence, film formation, analysis, route, Rac1, activation, necessary, and so on.

项目成果

Masahiro Nogami et al.: "Requirement of autophosphorylated tyrosine 992 of EGF receptor and its docking protein phospholipase C γ 1 for membrane ruffle formation"FEBS Letters. 536. 71-76 (2003)

Masahiro Nogami 等人：“EGF 受体的自磷酸化酪氨酸 992 及其对接蛋白磷脂酶 C γ 1 对于膜皱褶形成的要求”FEBS Letters 536. 71-76 (2003)。