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大腸菌secG-IeuUオペロンの発現調節に関する研究

大肠杆菌secG-IeuU操纵子的表达调控研究

基本信息

批准号：
12029205
负责人：
西山賢一
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

SecGは大腸菌における分泌蛋白質の細胞質膜透過に関与する膜内在性因子であり、secG遺伝子破壊株では膜透過阻害が起こり低温感受性となる。一方、IeuU遺伝子はロイシンコドンCUC、CUUに対応するtRNAをコードする。大腸菌ではロイシンCUC、CUUに対応するtRNAはIeuU遺伝子産物のみであると考えられており、IeuU遺伝子は生育に必須であると考えられる。secG遺伝子とIeuU遺伝子の間はわずか10塩基であり、これらはオペロンを形成している可能性が考えられていた。secG-IeuU遺伝子の発現機構を調べた結果、以下の知見が得られた。secG遺伝子のORFとIeuU遺伝子を含むDNA断片をアラビノースプロモーター支配下に配置したプラスミドpAG3では、アラビノースを添加したときのみSecGの発現が誘導された。pAG3存在下でsecG-IeuU遺伝子を破壊すると、アラビノース存在下では野生株並に生育したが、アラビノースを枯渇させると致死的となった。secG遺伝子のみを破壊すると低温感受性となるため、IeuU遺伝子は生育に必須な遺伝子であることが判明した。このことは、さらに、secG遺伝子内部にはIeuU遺伝子のプロモーターは存在しないことを示しており、secG遺伝子とIeuU遺伝子はオペロンを形成することが証明された。secG遺伝子、IeuU遺伝子に特異的なプローブを調製し、ノーザンブロッティングにを行ったところ、どちらのプローブとも反応する約600塩基からなるRNAが検出された。したがって、このRNAはSecGのmRNAであり、ロイシンtRNAの前駆体でもあることが明らかとなった。リファンピシンを加えてRNA合成を阻害すると、このRNAは速やかに分解した。半減期は約2-3分であり、非常に不安定なRNAであることが判明した。また、このRNAは5'末端(secG遺伝子側)から分解が進むことも明らかとなった。これらの知見については、現在論文作成中である。

SecG secretes proteins related to membrane permeability in E. coli, and secG gene disrupts plants related to membrane permeability resistance. A party, IeuU gene, CUC, CUU gene, tRNA, tRNA E. coli, CUC, CUU, tRNA, IeuU, IeuU The possibility of the formation of a new gene is examined. SecG-IeuU gene discovery mechanism to adjust the results, the following findings were obtained SecG gene ORF and IeuU gene contain DNA fragments, which are distributed under the control of the host. In the presence of pAG3, the wild plants are fertile and lethal. The cold susceptibility of the seed to reproduction is determined by the temperature. The existence of this gene in the internal part of the gene shows that the gene in the internal part of the gene is formed by the gene in the gene. SecG gene, IeuU gene specific protein modulation, gene expression, gene The mRNA of the gene is expressed in the mRNA of the gene. The RNA synthesis was inhibited by the increase in RNA production. The half-time period is about 2-3 minutes, very unstable RNA is determined. Also, this RNA breaks down at the 5'end (secG gene side) and progresses until it becomes clear. This article is written in Chinese.