筋興奮収縮連関解析用特異的分子プローブの設計とその活用

肌肉兴奋-收缩耦合分析的特定分子探针的设计和利用

• 批准号: 12045227
• 负责人: 細谷 孝充
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12045227/
• 关键词: ダントロレン; GIF-0082; リアノジン受容体; Ca^<2+>; 興奮収縮連関; CICR; 骨格筋; 光親和性標識

筋の収縮・弛緩は、筋細胞質内のCa^<2+>濃度の変化により巧みに制御・調節されている。骨格筋細胞では、生理的には細胞膜上で起こった電気的変化(興奮)を膜電位センサー(DHP受容体)が関知し、その情報が細胞内のCa^<2+>貯蔵部位である筋小胞体(SR)へと伝達され、Ca^<2+>が放出されることにより収縮が引き起こされる。この細胞膜の興奮から筋収縮までの一連の過程を興奮収縮連関と呼ぶが、その分子機構、特にSR膜上のCa^<2+>放出チャネルであるリアノジン受容体(RyR)がどのようにその開口状態(Ca^<2+>放出)を調節されているかについては未解明のままとなっている。また、骨格筋型リアノジン受容体(RyR-1)は、この生理的なCa^<2+>放出様式とは別にCa^<2+>によるCa^<2+>放出(Ca^<2+>-induced Ca^<2+> releasc=CICR)としての機能も併せ持つが、その意義についても不明である。悪性高熱症の実用薬であるダントロレンは、骨格筋のSRからのCa^<2+>放出を抑制し、生理的Ca^<2+>放出調節の重要因子を認識している可能性を有する。そこで本研究では、骨格筋の興奮収縮連関の分子機構の解明を目的として、ダントロレンをリード化合物とする特異的な分子プローブの開発を目指した。今回、光親和性標識法の活用によりCa^<2+>放出を制御している重要因子(標的タンパク質)を直接捕獲・同定することを目的として、いくつかの光親和性標識プローブ候補化合物を設計・合成した。そのうちアジド基含有のダントロレン誘導体であるGIF-0082が、RyR-1のCICRに影響を与えず、ダントロレンと同程度の単収縮(生理的なCa^<2+>放出の指標となる)抑制作用を有する選択的阻害剤としての機能を有することがわかった。また、実際の光親和性標識実験に用いるための放射標識体[^<125>I]GIF-0082の合成にも成功した。

The contraction and relaxation of the tendons and the <s:1> variation of the concentration of <s:1> Ca^<2+> in the cytoplasm of the tendons によ <s:1> skillful みに control and regulation されて る る. Skeletal muscle cells で は, physiological に は membrane で up こ っ た variations of electrical 気 (excited) を membrane potential セ ン サ ー (DHP were studied.the optimum processing capacity of body) が masato し, そ の intelligence の が cell Ca ^ 2 + > < 蔵 parts storage で あ る reinforced small cell body (SR) へ と 伝 da さ れ, Ca ^ 2 + > < が release さ れ る こ と に よ り 収 shrinkage が lead き up こ さ れ る. こ の membrane の excited か ら reinforcement 収 shrinkage ま で の の process を excited 収 shrinkage in a row even masato と shout ぶ が, そ の molecular machinery, special に SR membrane の Ca ^ 2 + < > release チ ャ ネ ル で あ る リ ア ノ ジ ン by let body (RyR) が ど の よ う に そ の opening status (Ca ^ 2 + > < release) を adjust さ れ て い る か に つ い て は not interpret の ま ま と Youdaoplaceholder0 なって る. ま た, skeletal muscle リ ア ノ ジ ン let body (RyR) は, こ の physiological な Ca ^ 2 + < > out others type と は don't に Ca ^ 2 + < > に よ る Ca ^ 2 + < > release (Ca ^ 2 + > < - induced Ca ^ 2 + > < releasc=CICR)と て て <s:1> function <e:1> and せ hold が が, そ そ meaning に, て, て unclear である. 悪 sexual high fever の be used 薬 で あ る ダ ン ト ロ レ ン は, skeletal muscle の SR か ら の Ca ^ 2 + > < released を control し, physiological Ca ^ 2 + > < out important factor regulating の を know し て い を る possibility has す る. そ こ で this study で は, skeletal muscle の excited 収 shrink even masato の molecular institutions の interpret を purpose と し て, ダ ン ト ロ レ ン を リ ー ド compound と す る specific molecular プ な ロ ー ブ の open 発 を refers し た. Today back light affinity identification method, which is の use に よ り Ca ^ 2 + > < release を suppression し て い る important factors (mark タ ン パ ク qualitative) を directly capture, with fixed す る こ と を purpose と し て, い く つ か の light affinity logo プ ロ ー ブ alternate compound を design, synthesis し た. そ の う ち ア ジ ド base contains の ダ ン ト ロ レ ン inductor で あ る が, RyR GIF - 0082-1 の CICR に influence を and え ず, ダ ン ト ロ レ ン と with degree の 単 収 shrinkage (physiological な Ca ^ 2 + < > release の index と な る) inhibition を have す る sentaku's resistance against tonic と し て の function を have す る こ と が わ か っ た. ま た, be interstate の light affinity id be 験 に with い る た め の radiation logo body [^ < 125 > I] GIF - 0082 の synthetic に も successful し た.

项目成果

S.Futagami, et al.: "Total Synthesis of Ravidomycin : revision of absolute and relative stereochemistry."Tetrahedron Lett.. 41・7. 1063-1067 (2000)

S. Futagami 等：“Ravidomycin 的全合成：绝对和相对立体化学的修订。”41・7 (2000)。

T.Hosoya, et al.: "Silicon-Directed Regioselective [2+2] Cycloaddition of α-Alkoxybenzyne and Ketene Silyl Acetals."Synlett. 4. 520-522 (2000)

T.Hosoya 等人：“α-烷氧基苯炔和乙烯酮甲缩醛的硅定向区域选择性 [2+2] 环加成”。Synlett. 4. 520-522 (2000)