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リンパ球性白血病に於けるウィルス蛋白によるセレクチンリガンド合成酵素の転写調節

淋巴细胞白血病中病毒蛋白对选择素配体合酶的转录调控

基本信息

批准号：
12213166
负责人：
平岩望
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213166/
关键词：
セレクチンリガンド fucosyltransferase VII Tax蛋白 CRE T-box One-hybrid法 CREB ATF bZIP

项目摘要

我々がクローニングに成功したセレクチンリガンド合成糖転移酵素Fuc-TVII遺伝子がHTLV-1 Tax蛋白により活性化され、enhancer部がLTR21-bpと相同の構造を持つとともに、その機序は、CREB/ATF転写因子を介した経路で更にprotein kinase A非依存性での活性化が可能であることを発見し、機能的相同性も認めた。そこには単に内因性のCRE領域と異なり、Fuc-T.VII遺伝子CRE-like enhancer部にはCREB/ATF転写因子以外に他の因子の関与が考えられた。そこで今回、CRE-like配列へのGel Shift AssayによりbZIP型転写因子以外に他の因子との相互作用を証明し、次に酵母One-HYbrid法により同部に結合する因子のクローニングを試みたところ、結合蛋白を100以上のクローンとして得ることが出来、シークエンシング等にて解析した。そしてCPEB/ATF転写蛋白因子と既知のTREB因子以外に、新規のT-box型の転写因子(hF7CAF-1と命名)を単離した。この新規因子のmRNAをNorthern Blot法にて調べたところHTLV-1感染T細胞株や刺激後のJurkat T細胞での発現増大を認めた。そこでhF7CAF-1の発現ベクターを作成し、Jurkatリンパ球でFuc-T VII遺伝子promoterのレポーター活性を測定したところ、約200%活性が上昇した。またTax単独時のレポーター活性上昇がhF7CAF-1併用により更に強まることを発見し、同遺伝子産物がTaxとの協調によるFuc-T VII遺伝子転写を増大することを認めた。このactivatorとしての作用は、CREB/ATF familyの一部の転写因子とも協調して働いていることを見出した。

We have successfully identified the activation and enhancement of Fuc-TVII gene in HTLV-1 Tax protein by LTR21-bp, the same structure, the same mechanism, CREB/ATF gene, and the independent activation of protein kinase A. In addition to the intrinsic CRE domain, Fuc-T.VII gene CRE-like enhancer is related to other factors other than CREB/ATF. The interaction between factors other than the ZIP type factor was demonstrated by the CRE-like alignment Gel Shift Assay, and the analysis of factors other than the ZIP type factor by the yeast One-HYbrid assay was performed. CPEB/ATF gene expression factors differ from known TREB gene expression factors and new T-box gene expression factors (hF7 CAF-1). Northern Blot analysis of mRNA expression of these novel factors revealed that HTLV-1 infected T cell lines and Jurkat T cell proliferation increased after stimulation. The activity of Fuc-T VII promoter was measured at about 200% and increased. The increase in activity of the tax-dependent Fuc-T-7 gene was due to the increase in the activity of the tax-dependent Fuc-T-7 gene and the increase in the activity of the tax-dependent Fuc-T-7 gene. The role of the activator in the CREB/ATF family is to coordinate the activities of the CREB/ATF family.