VEGF、Tie2、インテグリンの腫瘍血管内皮細胞生存シグナルのクロストーク

VEGF、Tie2 和整合素之间肿瘤血管内皮细胞存活信号的串扰

• 批准号: 12215138
• 负责人: 郡司 勇治
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215138/
• 关键词: Tie2; VEGF; B-Raf; Ake; MAPK; Dok-R; Bad

Tie2生存シグナルは主に2つの経路を用いていると考えられ、一方はPI3K/Akt経路であり、もう一方はMAPKを介する経路である。Akt経路は我々もTie2リン酸化後のAkt serine473のリン酸化を観察しており、今回Aktの下流でBad蛋白、forkhead転写因子、Caspase9のリン酸化、NFκBの活性化等のいずれが生存シグナルに関与するか検討した。Bad serine136やforkhead転写因子のリン酸化はみられず今後caspase9、NFκB経路の検討が必要と考えられた。もう一方の経路としてはTie2/B-Raf経路の検討を行った。今までの検討よりB-RafはTie2によりチロシンリン酸化され活性化がみられB-RafはTie2のシグナル伝違因子と考えられた。今回Angiopoietin-1濃縮sup刺激によるBad serine112のリン酸化がkinase dead B-RafやMEK阻害剤(PD98059)を用いることで抑制され、B-Raf/MAPK経路がBad serine112のリン酸化を介した生存シグナルに関与すると考えられた。このため、MAPKの下流でBadのリン酸化に関与するp90RSKのリン酸化を検討した。threonne360/serine364については明らかなリン酸化を認めず現在serine381のリン酸化を検討中である。今後他のRsk family(RSK-2、Rsk-3)の検討およびp90Rskのリン酸化が確認されればBad以外に生存シグナルに関係するCREBのリン酸化を検討する。また、近年Tie2の下流因子としてDok-Rがクローニングされた。我々の検討でもDok-RはTie2によりリン酸化された。一過性共発現の系でみるとDok-RはTie2によるMAPKの活性化を抑制した。このことはDok-RはEGF受容体の系と同じようにTie2/MAPK経路のnegative regulatorとして働くことを示唆し今後angiopoietin刺激によるMAPK活性化に対する影響を検討するとともに、Dok-Rの抑制がどのlevelでおこっているか検討するため、Dok-RのB-Rafリン酸化やMEK1/2のserine217/221のリン酸化への影響を検討していく。また、今回Dok-Rは免疫沈降法によりTie2の他にTie1とも複合体を形成することが観察された。Tie1、Tie2のみの共発現の系ではこれら受容体のheterodimer形成は確認できなかったが今後Dok-Rを受容体と同時に発現してheterodimer形成についての検討やTie1に結合したDok-RによるTie2シグナルの修飾について検討を加える。

Tie 2 survival mode 2 main mode 3 main mode 3 main mode 4 main mode 3 main mode 3 main mode 4 main mode 3 main mode 4 main mode 5 main mode 3 main mode 4 main mode 4 main mode 5 main mode 5 main mode Akt protein pathway is involved in the detection of Akt serine473 protein acidification after Tie 2 protein acidification, and now Akt downstream Bad protein, forkhead transcription factor, Caspase 9 protein acidification, NF κ B activation, etc. Bad serine 136 and forkhead transcription factor are essential for future caspase-9 and NF-κ B signaling. A side of the circuit is discussed in Tie 2/B-Raf. The B-Raf is activated by Tie 2 's activation factor. This paper reviews the effects of B-Raf/MAPK pathway on Bad Serine 112 kinase dead B-Raf/MEK inhibitor (PD98059) in response to Angiopoietin-1 concentrationsup stimulation. Bad acidification of MAPK downstream and p90 RSK downstream Threonne 360/Serine 364 is now Serine 381. In the future, the investigation of Rsk family (RSK-2, Rsk-3) and the investigation of CREB in p90 Rsk family were confirmed. In recent years, Tie 2 's downflow factor has been reduced to Dok-R. Dok-R is Tie 2. Transient co-occurrence of Dok-R inhibits MAPK activation in Tie 2. This study examined the effects of Dok-R on EGF receptor system, Tie2/MAPK pathway negative regulator and Dok-R inhibition on MAPK activation in response to angiopoietin stimulation, Dok-R B-Raf receptor acidification, 1/2 of serine217/221 and MEK acidification. The formation of Tie 2 and Tie 1 complex was observed by Dok-R immuno-sedimentation method. Tie 1, Tie 2 and their co-occurrence system are determined by determining the heterodimer formation of the receptor and simultaneously detecting the heterodimer formation of the receptor in the future. Tie 1 and Tie 2 are combined with Dok-R. Tie 2 is modified.

项目成果

Gunji Y: "Tie-1, Tie-2 receptors, Ang-1 and Ang-2 ligands.In : Tumor angiogenesis and Microcirculation."(eds.Voest,E.E and D'Amore,P.A.)(in press). (2001)

Gunji Y：“Tie-1、Tie-2 受体、Ang-1 和 Ang-2 配体。In：肿瘤血管生成和微循环。”（编辑 Voest，E.E 和 DAmore，P.A.）（出版中）。

Alitalo,K: "VEGF receprors in vascular development and hematopoiesis In : Developmental Biology of Hematopoiesis."(ed.Zon, L) Oxford University press. (in press).

Alitalo，K：“血管发育和造血中的 VEGF 受体：造血发育生物学”（ed.Zon，L）牛津大学出版社。