骨髄間質細胞との共培養法を用いた臍帯血未分化幹細胞の同定および増幅システム

与骨髓基质细胞共培养的脐带血未分化干细胞鉴定及扩增体系

• 批准号: 07770874
• 负责人: 郡司 勇治
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770874/
• 关键词: Card blood; Stem Cell; LTC-IC; Premature infant

臍帯血の造血前駆細胞は未熟な造血幹細胞を多く含むことから基礎的研究としても臨床応用としても注目されており、たとえば、正期産児の臍帯血を用いてFanconi貧血等の移植治療が行われている。しかし、早期産児の臍帯血についてはその生物学的特徴は明らかにされていない。そこで未分化造血幹細胞(LTC-IC)を含めた造血前駆細胞については長期培養、コロニー形成能、表面抗原の発現など調べ早期産児臍帯血の特徴を検討した。1)先ず幹細胞を含む造血前駆細胞が発現していると考えられるCD34分子を発現している細胞の割合を早期産児および正期産児の臍帯血でで比較したところ差は認めなかった。2)次に各臍帯血よりFACSを用いsortingしたCD34陽性細胞をコロニー形成法を用い検討したところ顆粒球系前駆細胞であるGMコロニーは早期産正期産児で差はなかったが、赤芽球系前駆細胞と考えられるBFU-Eおよび、より未分化と考えられるMixコロニーは早期産児臍帯血のCD34陽性細胞により多く存在した。3)ヒト骨髄より作成したストローマ細胞と造血前駆細胞を共培養するとCFCより未分化な造血前駆細胞は5週をこえてコロニー形成能を維持し、この時のコロニー数が最初の段階の未分化造血前駆細胞(LTC-IC)を定量的にあらわすことが証明されている。このLTC-ICの検討を各臍帯血由来のCD34陽性細胞を用い検討したところ早期産児臍帯血により多く含まれていた。4)また、我々は骨髄血ではCD34陽性細胞中KIT弱陽性,Fas陰性分画に未分化造血前駆細胞が存在することを報告してきたが、臍帯血におけるこれら表面抗原の発現を検討したところ、より未分化な造血細胞がenrichされていると考えられる早期産児CD34陽性細胞でKIT陰性(含む弱陽性)、Fas陰性細胞の割合が低かった。今後は早期産児臍帯血を用いたex vivoでの幹細胞増幅の可能性を検討する。

The number of immature hematopoietic stem cells in umbilical cord blood is increasing, and basic research and clinical application are focusing on the use of fetal umbilical cord blood in Fanconi anemia. The biological characteristics of the umbilical cord blood in early childbirth are not obvious. The characteristics of undifferentiated hematopoietic stem cells (LTC-IC), including hematopoietic progenitor cells, are discussed in terms of long-term culture, cell formation, surface antigen production, and regulation of early fetal umbilical blood. 1)The development of stem cells, including hematopoietic progenitor cells, is a major step in the development of CD34 molecules. 2)CD34-positive cells in umbilical cord blood were sorted by FACS, and CD34-positive cells in umbilical cord blood were detected by FACS. The results showed that CD34-positive cells in umbilical cord blood were more likely to exist in umbilical cord blood than in normal umbilical cord blood. 3) The number of undifferentiated hematopoietic progenitor cells (LTC-IC) in the initial stage was quantified at the time of co-culture of undifferentiated hematopoietic progenitor cells (UPCs) for 5 weeks. The LTC-IC study of CD34-positive cells in the umbilical cord blood was carried out in the early stages of fetal umbilical cord blood production. 4) The expression of KIT was weak positive in CD34 positive cells,Fas negative cells and undifferentiated hematopoietic progenitor cells in umbilical cord blood. The possibility of stem cell amplification in ex vivo is discussed in the future.