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GFP標識細胞を用いた放射線応答遺伝子の解析

使用 GFP 标记细胞分析辐射响应基因

基本信息

批准号：
12217040
负责人：
平野和也
金额：
$ 3.78万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217040/
关键词：
GFP radiation MUCl tumor antigen

项目摘要

in vivoでの腫瘍の放射線応答、照射効果の解析を行うため、GFP標識細胞を利用してin vivoでの照射後、少数のGFP標識細胞を回収し、c-myc,c-fos,p53,p21,MUCl等の放射線応答遺伝子の発現の変化を解析する系の開発をめざす。本年度は特定の細胞株HT-29を用いて、特定の放射線応答分子としてMUClに注目して解析を行った。まずHT-29/GFP細胞を樹立した。増殖速度、X線感受性等の各種性状解析を行い、親株と同様の性質であることを確認した後、ヌードマウスに移植し、in vivoでの腫瘍形成を行い、in vivoでX線照射した後にGFP標識細胞選択回収し、放射線応答分子MUClの発現を解析する系を確立することができた。またMUClのin vitroとin vivoでの応答パターンを比較することが可能となった。さらに他の細胞系、応答分子、測定系について解析をすすめる予定である。本年度は、特定の細胞株、特定の放射線応答分子についてではあるが、in vivoでX線照射した後にGFP標識細胞選択回収し、放射線応答分子の発現を解析する系を確立することができた。以上により、本研究においてMUClの発現に注目することとした。次年度以降は放射線照射後、より少数の細胞を迅速に、マウスから回収し、RT-PCR法による解析系を確立することをめざす。そして放射線応答に関写し、あるいは誘導されることが知られている蛋白(p53、p21、p41等)、増殖、転移に関与する分子(HGF、MUCl等)のmRNAの発現を調べ、in vitroとin vivoでの発現の異同を比較する。その結果、in vitroとin vivoで応答に違いのあった遺伝子については、さらにその原因を調べ、in vivoでの照射効果判定への応用の可能性を検討する。

in vivoで <s:1> abscess <e:1> radiation 応 answer, irradiation effect <e:1> analysis を row うため, GFP-labeled cells を utilize ててin After irradiation with vivoで <s:1>, a few <s:1> GFP-labeled cells を reproduce <s:1>, c-myc,c-fos,p53,p21,MUCl and other <s:1> radiation 応 respond to the 伝 particle of 伝, and <s:1> changes occur を analysis する the する is caused by the development of をめざす. This year は in certain の cell lines HT - 29 をいて, specific の radiation 応 a molecular として MUCl に attention し analytical line をってた. Youdaoplaceholder0 HT-29/GFP cells を establish た. Rights colonization rate, X-ray analytical line をいの various properties such as sensitivity, parent strain と with others in nature のであることを confirm した, ヌードマウスしに transplantation, the in vivo での swollen sores form line をい, in Vivo で X-ray irradiation した after に GFP logo cells sentaku 収 back し, radiation 応 a molecular MUCl の発 now を parsing すをる department establish することができた. また MUCl の in vitro と in vivo での応 answer パターンを compare することが may となった. Youdaoplaceholder0 his <s:1> cell line, 応 molecule, determination line にさらにてて analysis をすすめる determination である. This year はの cell lines, and at a specific の radiation 応 a molecular についてではあるが, the in vivo で X-ray irradiation した after に GFP logo cells sentaku 収 back し, radiation 応 a molecular の発 now を parsing すをる department establish することができた. The above によによ, this study におによてMUCl た has に attention するととととたたた. Annual in は after radiation exposure, より minority の cell をに quickly, マウスから back 収し, rt-pcr method による parsing system を establish することをめざす. そして radiation 応 answer に masato write し, あるいは induced されることが know られている protein (p53, p21, p41, etc.), raised colonization, planning に masato and する molecules (HGF and MUCl) の mRNA の発をべ, now in vitro と in vivo での発 is のを compare similarities and differences する. その results, the in vitro と in vivo で応 answer に violations いのあった posthumous son 伝については, さらにその reason をべ, in vivo での irradiation unseen fruit determine への応 possibility with のを beg す検る.