アンチセンス/リボザイムテクノロジーを用いた家畜の性比制御に関する研究

利用反义/核酶技术控制家畜性别比的研究

• 批准号: 12876063
• 负责人: 舘 鄰
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Azabu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12876063/
• 关键词: SRY; アンチセンスSry; 抗SRYリボザイム; ハンマーヘッド型リボザイム; tRNAリボザイム複合体; 性決定; 性転換; トランスジェニックマウス; Sry; アンチセンスRNA; リボザイム; pCAAGS; polIIIプロモーター; ハンマーヘッド; ヘアピン

本研究の目的は、アンチセンスmRNAを発現させて特定の遺伝子の転写産物を翻訳レベルで抑制するアンチセンステクノロジー、および、特定の遺伝子転写産物を酵素活性をもったRNAを用いて分解するリボザイムテクノロジーを駆使して、遺伝子操作により、出生時性比が雌に傾斜するような、人工的家畜品種を作出するための基礎研究を、マウスをモデル動物として、実施することにある。この目的を達成するために、現在、トランスジェニックマウス作出において最も強力なpromoter/enhancer complexもつvectorであるとされるpCAGGS(阪大宮崎純一教授から供与済み)を用いて、アンチセンスSry、対Sryリボザイムを発現させたトランスジェニックマウスを作出して、その生殖巣、生殖器官における表現型の解析を行った。その結果、12匹(雄10、雌2)のトランスジェニックマウスが得られたが、表現型と遺伝型は全て一致していた。これらのマウスをfounderとして、非トランスジェニックマウスと交配して、F1を得たところ表現型が雌でありながら、Y染色体のマーカーであるZfyを有している個体が11匹得られた。これらのマウスについて、なお詳細な解析を行っている。一方、対Sryリボザイムを、ハンマーヘッド型、tRNA-ribozyme complex型数種類を設計した。これらのリボザイムにつき、in vitroにおける、Sry mRNAに対する切断効果を検討した結果、切断が生起することを確認した。今後、これらリボザイムのin vivoにおける効果を確認する計画である。

は の purpose, this study ア ン チ セ ン ス mRNA を 発 now さ せ て specific の posthumous son 伝 の product planning write を turn 訳 レ ベ ル で inhibit す る ア ン チ セ ン ス テ ク ノ ロ ジ ー, お よ び, specific の heritage 伝 child product planning write を enzyme activity を も っ た RNA を with い て decomposition す る リ ボ ザ イ ム テ ク ノ ロ ジ ー を 駆 make し て, heritage 伝 sub operations に よ り, out Female birth sex ratio が に tilt す る よ う な, artificial livestock breeds を make す る た め の を basic research, マ ウ ス を モ デ ル animal と し て, be す る こ と に あ る. こ の purpose を reach す る た め に, now, ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス make に お い て も most powerful な promoter/enhancer Complex も つ vector で あ る と さ れ る pCAGGS (e. palace battery professor junichi か ら 済 and supply み) を with い て, ア ン チ セ ン ス Sry, Sry リ seaborne ボ ザ イ ム を 発 now さ せ た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を make し て, そ の reproductive 巣, reproductive organs に お け る phenotype の parsing line を っ た. そ の results, 12 (2) male, 10 female horse の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス が have ら れ た が と phenotypes, but type 伝 は て all consistent し て い た. こ れ ら の マ ウ ス を founders と し て, non ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス と mating し て, F1 を た と こ ろ phenotype が female で あ り な が ら, Y chromosome の マ ー カ ー で あ る Zfy を have し て い る が 11 individual horse must ら れ た. Youdaoplaceholder5 れら れら れら ウスに ウスに ウスに て て て, なお detailed な analysis を lines って る る る. Party, Sry リ seaborne ボ ザ イ ム を, ハ ン マ ー ヘ ッ ド type, tRNA - ribozyme complex type design several kinds を し た. こ れ ら の リ ボ ザ イ ム に つ き, the in vitro に お け る, Sry mRNA に す seaborne る cut sharper fruit を beg し 検 た results, cutting が arise す る こ と を confirm し た. in the future, れらリボザ ム ム <s:1> in vivoにおける will confirm the する plan である.

项目成果

舘鄰: "遺伝子の機能を解析する.「家畜ゲノム解析と新たな家畜育種戦略」(分担執筆)"動物遺伝育種シンポジウム組織委員会編、蓄産技術協会. 6 (2000)

N. Tate：“分析基因功能。牲畜基因组分析和新牲畜育种策略”（合著者），由畜牧技术协会动物遗传与育种研讨会组委会编辑6（2000）。

舘 鄰: "応用動物科学への招待"朝倉書店. 145 (2001)

立直：《应用动物科学邀请》朝仓书店 145 (2001)。

Kim CH, Seo BB, Yamanouchi K, Kuromaru M, Sawasaki T, Hinsch E, Hinsch KD, Naito K, Tachi C, Tojo H.: "Essential role of ZP molecules in tubal transport of embryos in mice"Mol. Reprod. Dev.. 61. 327-334 (2002)

Kim CH、Seo BB、Yamanouchi K、Kuromaru M、Sawasaki T、Hinsch E、Hinsch KD、Naito K、Tachi C、Tojo H.：“ZP 分子在小鼠胚胎输卵管运输中的重要作用”Mol。

Nakamura N, Yamakawa N, Sato T, Tojo H, Tachi C, Furukawa K.: "Differential gene expression of beta-1,4-galactosyltrasferases I, II and V during mouse brain development"J. Neurochem.. 76. 29-38 (2001)

Nakamura N、Yamakawa N、Sato T、Tojo H、Tachi C、Furukawa K.：“小鼠大脑发育过程中 β-1,4-半乳糖基转移酶 I、II 和 V 的差异基因表达”J.

柏原孝夫,河本馨,舘鄰(共編): "動物遺伝学"文永堂出版、東京. 237 (2000)

Takao Kashihara、Kaoru Kawamoto 和 Nao Tate（联合编辑）：《动物遗传学》Buneido Publishing，东京 237 (2000)。