胚性幹細胞の生殖系列細胞へのin vitro分化誘導に関する基礎研究

胚胎干细胞体外分化诱导为生殖细胞的基础研究

• 批准号: 09876072
• 负责人: 舘 鄰
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Azabu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09876072/
• 关键词: ES細胞; 始原生殖細胞; EG細胞; 生殖系列; 卵黄嚢細胞; ワィーダー細胞; 4C9; 2C9; フィーダー細胞

胚性幹細胞(ES細胞)や胚性生殖細胞(EG細胞)は、遺伝子ターゲティング以外にもさまざまな応用が応用動物科学分野で試みられている。現在のところ、ES細胞から生殖系列細胞を確立した報告は無いが、適当な培養条件でES細胞をin vitroで生殖細胞系列化することができれば、その応用動物科学上の意味は極めて大きい。本研究の目的は、マウスES細胞をin vitroでPGCに分化誘導する条件を確立し、さらに、得られた結果をもとに、家畜のES細胞、ないしはES-like細胞について同様の実験を試み、将来の実用化への基礎を確立することにある。この目的に向けて、本年度は、単一のES細胞を胚盤胞に顕微注入して、その分化能、特に、生殖系列への分化能を解析した。その結果、単一のES細胞が生殖系列、および、解析を行った限りにおける全ての体細胞系譜に分化可能であることを確認した。さらに、ES細胞のfeeder細胞として、従来から用いられているembryonic fibroblastsの他、yolk sac細胞をfeeder細胞として用い、ES細胞(R1株)の培養を試みた。PGCのマーカーとして、しばしば用いられる4C9抗体の他、2C9など複数のPGC特異的抗体を用いて、さまざまな条件下で培養したES細胞を蛍光抗体法により解析した。特にXXの核型をもつES細胞について検討を行った。ES細胞の中でも、移動性の細胞に4C9陽性細胞が多いことが確認された。さらに、マトリゲル上で培養したES細胞のコロニーの中に、コロニー全体が4C9、2C9に対して陽性反応を示すものがあることが確認され、ES細胞の生殖系列細胞化に、興味深い予備的結果が得られた。これらの知見を端緒として、現在さらに研究を進めている。

Embryonic stem cells (ES cells) や embryonic germ cells (EG cells) は, but 伝 タ ー ゲ テ ィ ン グ outside に も さ ま ざ ま な 応 with が 応 try using animal science eset で み ら れ て い る. Now の と こ ろ, ES cells か ら series of reproductive cells を establish し は た report no い が, appropriate な を で ES cells in vitro culture で germ cell series す る こ と が で き れ ば, そ の 応 の using animal science means は extremely め て big き い. は の purpose, this study マ ウ ス を ES cells in vitro で PGC に induction す を established し る conditions, さ ら に, ら れ た results を も と に, livestock の ES cells, な い し は ES - like cells に つ い て with others の be 験 の を み, future be in turn へ の based を す る こ と に あ る. こ に の purpose to け て, this year's は, 単 の ES cells を blastoderm cell に 顕 micro injection し て, そ の differentiation can, に series, reproductive へ の differentiation can を parsing し た. そ の result, 単 の が reproductive series, ES cells お よ び, analytical を っ た limit り に お け る full て の genealogy に differentiated somatic cells may で あ る こ と を confirm し た. さ ら に, ES cells の feeder cells と し て, 従 か ら with い ら れ て い る embryonic fibroblasts の him, yolk sac cells を feeder と し て い, ES cells (R1) strains の cultivate を try み た. PGC の マ ー カ ー と し て, し ば し ば with い ら れ る c9 antibody の he, 2 c9 な ど plural の を PGC specific antibody with い て, さ ま ざ ま な conditions で cultivate し た ES cells を 蛍 light antibody technique に よ り parsing し た. Special にXX <s:1> karyotype を を に ES cells に て検 て検 て検 seek を rows った. In ES cells <s:1>, で で and in mobile <s:1> cells に, 4C9 positive cells が are confirmed to be multiple とが とが. さ ら に, マ ト リ ゲ nurturing で ル し た ES cells の コ ロ ニ ー の に, コ ロ ニ ー all が 4 c9, 2 c9 に し seaborne て positive anti 応 を shown す も の が あ る こ と が confirm さ れ, ES cells の reproductive series に, the result of interests deep い to prepare が ら れ た. Youdaoplaceholder6 れら <s:1> insights を endpoints と <s:1> て, current さらに research を advances to めて る る る.

项目成果

舘 鄰 他4名: "Developmental fate of single embryonic stem cells microinjected into 8-cell-stage mouse embryos." Differentiation. 62. 1-11 (1997)

Nao Tate 和其他 4 人：“显微注射到 8 细胞阶段小鼠胚胎中的单个胚胎干细胞的发育命运。”62. 1-11 (1997)。

舘 鄰 他7名: "Wilm's tumor suppressor gene(WT-1)as a target gene of SRY function in a mouse ES cell line trandfected with SRY." Int.J.Dev.Biol.42. 1143-1151 (1998)

Jin Tate 和其他 7 人：“Wilm 肿瘤抑制基因 (WT-1) 作为 SRY 转染的小鼠 ES 细胞系中的靶基因。Int.J.Dev.Biol.42 (1998)。

舘 鄰 他5名: "Expression and localization of membrane type matrix metalloproteinase-1(MT1-MMP)in trophoblast cells of cultured mouse blastocysts and ectoplacental cones." Placenta. 19. 41-48 (1998)

Na Tate 和其他 5 人：“培养的小鼠囊胚和胎盘外胎盘的滋养层细胞中膜型基质金属蛋白酶-1 (MT1-MMP) 的表达和定位。”19. 41-48 (1998)。

舘 鄰 他7名: "Molecular cloning of cDNA encoding the c-kit receptor of Shiba goats and a novel alanine insertion specific to goats and sheep in the kinase insert region." Biochim.Biophys.Acta. 1352. 151-155 (1997)

Na Tate 和其他 7 人：“编码柴山羊 c-kit 受体的 cDNA 的分子克隆以及激酶插入区域中山羊和绵羊特异性的新型丙氨酸插入。”1352. 151-155 (1997) ）

舘 鄰 他7名: "Effects of transfected human and mouse SRY/Sry genes upon the expression of hypothe-tical sry-cascade genes in cultured mouse sertoli cell line, TM-4." J.Reprod.Dev.42. 255-263 (1997)

Jin Tate 和其他 7 人：“转染的人类和小鼠 SRY/Sry 基因对培养的小鼠支持细胞系 TM-4 中假设的 sry 级联基因的表达的影响。”J.Reprod.Dev.42。 263 (1997)