低分子G蛋白、Rhoの創収縮における役割の解明

阐明 Rho（一种小 G 蛋白）在伤口收缩中的作用

• 批准号: 12877183
• 负责人: 中島 龍夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877183/
• 关键词: 創傷治癒; 創収縮; 低分子GTP蛋白Rho; ROCK; コラーゲンゲル収縮

Rho下流エフェクター、ROCKの創収縮への影響を検討するため、ROCK阻害剤、Y-27632による創収縮モデルに対する効果をin vitro,in vivoの実験系で検証した.1.Y-27632(10μM)のin vitro創収縮モデルに対する影響1)コラーゲン内3次元培養線維芽細胞によるコラーゲンゲル収縮を阻害リソフォスファチジル酸(LPA)による急激な収縮はY-27632により完全に阻害され、その後の緩徐な収縮は部分的に阻害された.PDGFによる緩徐な収縮は部分的に阻害された.2)コラーゲンゲル内での細胞長の短縮を阻害LPA投与後の急激な細胞収縮は、Y-27632により完全に阻害された.PDGF投与によっては細胞長は変化しなかった。3)コラーゲン内での細胞の伸長を助長コラーゲン内に細胞を播種した後の細胞長の伸長は、Y-27632治療群にて増強された.4)遊走を阻害ボイデンのケモタキシス・チャンバーにより、LPA,PDGFによる遊走を、Y-27632はdose dependentに阻害した.2.Y-27632のラット創収縮モデルに対する影響ラット背部の1cmx1cm円形皮膚欠損創の創収縮にあたえる影響を検討した.1)連日痂皮を除去し創部にY-27632 30μM(PBS)を投与、2)連日痂皮下にY-27632 30μM(PBS)を注入し、創部をトレースしたが、注入操作や剥離操作によりばらつきが大きく、一貫した結果がえられなかったため、3)浸透圧ポンプにて持続的に創部周囲に5日間投与し、5日目に創サイズを測定したところ、Y-27632治療群で創は優位に大きく、創収縮を阻害することが判明した。これらにより、ROCK阻害剤、Y-27632がin vitro,in vivo両方において、創収縮を阻害することが明らかになった。今後、培養細胞による創治療等に、活性型ROCKを遺伝子導入するなどの応用の可能性が広がったと考える.

Rho obscene エ フ ェ ク タ ー, ROCK の gen 収 shrinkage へ の influence を beg す 検 る た め, ROCK resistance against tonic, Y - 27632 に よ る gen 収 shrinkage モ デ ル に す seaborne る unseen fruit を in vitro, in vivo の be 験 department で 検 card し た. 1. The Y - 27632 (10 microns) の in Vitro gen 収 shrinkage モ デ ル に す seaborne る effect 1) コ ラ ー ゲ ン within 3 yuan culture line d bud cells に よ る コ ラ ー ゲ ン ゲ ル 収 shrinkage を resistance against リ ソ フ ォ ス フ ァ チ ジ ル acid (LPA) に よ る nasty shock な 収 shrinkage は Y - 27632 に よ り completely に resistance against さ れ, そ の の slow after xu な 収 part of shrinkage は に resistance against さ れ た. PDGF に よ る Slow xu な 収 part of shrinkage は に resistance against さ れ た. 2) コ ラ ー ゲ ン ゲ ル within で の cells long の shortening を cast and resistance against LPA の nasty shock 収 な cell shrinkage after は, Y - 27632 に よ り completely に resistance against さ れ た. Cast and PDGF に よ っ て long は は cells - the し な か っ た. Within 3) コ ラ ー ゲ ン で の の cell elongation を fuelling コ ラ ー ゲ ン を に cells within the seeding し た の cells after long の elongation, Y - 27632 treatment group は に て raised strong さ れ た. 4) traveling を resistance against ボ イ デ ン の ケ モ タ キ シ ス · チ ャ ン バ ー に よ り, LPA, PDGF に よ る wander を, Y - 27632 は dosed Dependent に resistance against し た. 2. The Y - 27632 の ラ ッ ト gen 収 shrinkage モ デ ル に す seaborne る influence ラ ッ ト back の 1 cmx1cm has drifted back towards &yen; form skin owe loss gen の gen 収 shrinkage に あ た え る influence を beg し 検 た. 1) days scab skin を remove し gen に Y - 27632 30μM(PBS)を administered to 2) subcutaneous にY-27632 for several consecutive days 30 microns (PBS) を injection し, gen を ト レ ー ス し た が, injection や stripping operation に よ り ば ら つ き が big き く, consistent し た results が え ら れ な か っ た た め, 3) to soak 圧 ポ ン プ に て hold 続 に gen department weekly 囲 に cast with し 5 day, 5 eyes に gen サ イ ズ を determination し た と こ ろ で chong は optimal treatment group, Y - 27632 The size of に is large and く is く, the size of the invention is を, the harm is する <s:1> とが, and the judgment is た. こ れ ら に よ り, ROCK resistance against が tonic, Y - 27632 in vitro, in vivo struck party に お い て, gen 収 shrinkage を resistance against す る こ と が Ming ら か に な っ た. In the future, the cultured cells に よ る gen therapy に, reactive type ROCK を posthumous son 伝 import す る な ど の 応 possibility with の が hiroo が っ た と exam え る.