小胞体に局在するsyntaxin18の細胞内機能に関する研究

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真核細胞内には、それぞれ異なる機能を持つ膜で囲まれたオルガネラが多数存在し、それぞれ特有のタンパク質が局在している。小胞輸送は、タンパク質を細胞外へ分泌したり、リソソームなどのオルガネラに輸送するための手段である。syntaxinは小胞と目的膜との融合に関与するタンパク質であり、少しずつ構造の異なる分子種がそれぞれ異なったオルガネラに分布している。syntaxin18(syn18)は小胞体に局在し、小胞体-ゴルジ体間の小胞輸送に関与するタンパク質である。我々はsyn18モノクローナル抗体を用いたsyn18結合タンパク質の検索を行い、新規タンパク質p31およびRINT-1、ZW10をsyntaxin18結合タンパク質として同定した。RINT-1はRad50(遺伝子の修復に関与)と結合するタンパク質で、G2/M期のチェックポイントに関与するタンパク質であり、ZW10は動原体結合タンパク質で、ダイニンの動原体への結合を助け、紡錘体形成のチェックポイント機能を持つタンパク質であった。酵母を使ったtwo-hybridアッセイの結果から、RINT-1とZW10およびp31とsyn18が直接相互作用していることが判明した。またP31、RINT-1, ZW10はsyn18複合体中でサブコンプレックスを形成しいて、ATPaseであるNSFの加水分解依存的にこのサブコンプレックスはsyn18から解離した。さらに培養細胞内でのZW10の過剰発現および、RNAi法によるZW10のノックダウンの実験からZW10が間期においては小胞体-ゴルジ体間の小胞輸送に関与することが示唆された。以上の結果、細胞周期のチェックポイントタンパク質として機能しているZW10とRINT-1が間期においては複合体を形成し、p31を介してsyn18と結合し小胞輸送に関与するが、細胞周期に依存した何らかの調節によってRINT-1とZW10はチェックポイントタンパク質として機能するのではないかと考えられる。チェックポイントに関与するタンパク質が小胞輸送に関与しているということは今まで報告されておらず、新しい知見である。これらの結果は小胞輸送と細胞周期の間に何らかのクロストークが存在する可能性を示唆する。