NMDA受容体と癌抑制遺伝子産物APCおよびDLGファミリーの複合体形成意義

NMDA受体与抑癌基因产物APC和DLG家族形成复合物的意义

• 批准号: 01J05854
• 负责人: 原口 景子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J05854/
• 关键词: NMDA; APC; DLG

NMDA受容体は海馬における長期増強(LTP)に必須なイオンチャンネルである。NMDA受容体のC末端にはPSD-95などのDLGファミリー蛋白質が結合し、NMDA受容体のクラスタリングに関与していることが明らかにされている。さらに、大腸癌抑制遺伝子産物APCはPSD-95やDLGと複合体を形成し、これらがPSD-95のオリゴマー形成によりNMDA受容体-PSD-95複合体と会合しひとつの複合体として存在することから、本研究はAPCのDLGファミリー蛋白質結合モチーフS/TXVを破壊したマウスを作製しその表現型の解析を目的としている。本年度の研究実績は以下の通りである。(1)APC、DLGファミリー蛋白質結合モチーフS/TXVを欠損マウスを作製するため構築したターゲッティングベクターをエレクトロポレーション法によりES細胞TT2へ導入し、相同組換えを起こしたES細胞抗生物質G418を用いてスクリーニングを行った。(2)アグリゲーション法またはインジェクション法によりキメラマウスを作製した。(3)ホモ欠損マウスを作製するためにヘテロ欠損マウスの交配を行い、ホモ欠損マウスを得た。(4)得られたホモ欠損マウスの個体レベルでの表現形を解析するために、ホモ欠損マウス脳より調製した組織切片の電子顕微鏡による観察、脳特異的マーカーの染色を行った。またホモ欠損マウスを電気生理学的、あるいは空間学習能などを行動学的な手法を用いて解析を行った。今後、引き続き新たなラインのホモ欠損マウスの作製とその表現型を詳細に解析し、脳の発生と分化、神経回路形成、海馬における長期増強(LTP)や小脳における長期抑圧(LTD)等神経の可塑性、あるいは空間学習能など、生化学的、分子細胞生物学的、電気生理学的、行動学的に解析を行うことを計画している。

The long-term enhancement (LTP) of the NMDA receptor, the <s:1> hippocampus, に must be な, <s:1>, <s:1>, チャ, ネ, である and である. NMDA by let body の C terminal に は PSD - 95 な ど の DLG フ ァ ミ リ ー protein が combining し, NMDA let body の ク ラ ス タ リ ン グ に masato and し て い る こ と が Ming ら か に さ れ て い る. さ ら に, colorectal cancer inhibition but the latter's 伝 APC や は PSD - 95 DLG と complex を し, こ れ ら が PSD - 95 の オ リ ゴ マ ー form に よ り NMDA by let body - the PSD - 95 complex meet と し ひ と つ の complex と し て exist す る こ と か ら, this study は APC の DLG フ ァ ミ リ ー protein モ チ ー フ S/TXV を broken 壊 し た マ ウ ス を cropping し そ の phenotype の parsing を purpose と し て い る. The research achievements of the current year are as follows である である. (1) the APC and DLG フ ァ ミ リ ー protein モ チ ー フ S/TXV を owe loss マ ウ ス を cropping す る た め build し た タ ー ゲ ッ テ ィ ン グ ベ ク タ ー を エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン method に よ り ES cells TT2 へ import し, the same group in え を up こ し た ES cells antibiotic G418 を with い て ス ク リ ー ニ ン グ を Line った. (2) ア グ リ ゲ ー シ ョ ン method ま た は イ ン ジ ェ ク シ ョ ン method に よ り キ メ ラ マ ウ ス を cropping し た. (3)ホモ underloss ホモ ウスを to make するためにヘテロ underloss <e:1> ウス <s:1> to cross を rows を and ホモ underloss ウスを to obtain た. (4) ら れ た ホ モ owe loss マ ウ ス の individual レ ベ ル で の performance form analytical す を る た め に, ホ モ owe loss マ ウ ス 脳 よ り modulation し た biopsy の electronic 顕 micromirror に よ る 観 examine, 脳 specific マ ー カ ー の dyeing line を っ た. ま た ホ モ owe loss マ ウ ス を electric 気 physiology, あ る い は space can learn な ど を action learning な gimmick を with い analytical line を っ て た. In the future, lead き 続 き new た な ラ イ ン の ホ モ owe loss マ ウ ス の cropping と そ の phenotype を detailed analytical し に, 脳 の 発 と differentiation, god 経 loop formation, hippocampal に お け る strong long-term rights (LTP) や small 脳 に お け る long-term 圧 suppression (LTD), and other god 経 の plasticity, あ る い は space can learn な ど, biochemistry, molecular and cellular biology, electricity 気 The に analysis of physiology and action science を line う とを とを plan <s:1> て る る る る.