マウス初期胚におけるJaK2の発現と機能について

JaK2在小鼠早期胚胎中的表达和功能

• 批准号: 01J06359
• 负责人: 伊藤 昌彦
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J06359/
• 关键词: マウス; 初期胚; チロシンリン酸化酵素; Jak2

細胞増殖や分化のシグナル伝達において、チロシンリン酸化酵素は重要な役割を果たしている。マウス初期胚では、これまで発生の調節に関与するいくつかの成長因子が報告されている(Insulin、IGF-I、EGF、TGF-αなど)。これらの受容体はチロシンリン酸化酵素活性をもち、初期胚のシグナル伝達に関与していると思われるが、その機能は4細胞期以降において明らかにされているだけであり、それ以前の時期、受精後から4細胞期までの発生を調節するチロシンリン酸化酵素についての知見は得られていない。したがって、4細胞期以前の発生を調節するシグナル伝達は成長因子の受容体以外のチロシンリン酸化酵素を介する可能性も考えられる。そこで、受精から4細胞期の発生を調節するチロシンリン酸化酵素を同定し、その機能を明らかにすることにより、マウス初期胚の発生制御機構を解明することを目的として本研究を行った。これまでの実験から、マウス初期胚においてチロシンリン酸化酵素Jak2が発現しており、本来シグナルを伝達するために細胞膜近傍に存在しているJak2が核および染色体に局在するという新規の知見を得たことから、この移行のメカニズムおよび核内での機能を明らかにするための実験を試みた。はじめに、染色体への移行のメカニズムを明らかにするために、2細胞期前期におけるJak2の核内での一様な局在に注目した。一般的に2細胞期前期の核内では精子由来、卵子由来の染色体は別々に分かれて局在している。しかしながら、1細胞期におけるJak2の局在は雌性前核に特異的であることから、精子由来の染色体に移行していることが考えられる。そこで、Jak2が精子由来の染色体に移行する時期を調べた結果、分裂期の中期から後期にかけて移行することが明らかとなった。この時期にはクロマチン構造に大きな変化が起きることが知られていることから、クロマチン構造によりJak2の移行が制御されていることが示唆された。このことは雄性前核やNIH3T3細胞の核を未受精卵に移植した細胞では、Jak2は染色体に蓄積しないことからも確かめられ、Jak2の染色体への蓄積はクロマチン構造の違いに依存していることが示された。つぎに、核内におけるJak2の機能を明らかにするために、DNAのメチル化との関連を検証した。雄性前核のDNAは受精直後に急激に脱メチル化をされる。したがって、雌性前核特異的なJak2の局在はDNAのメチル化に関連している可能性がある。はじめにDNAメチル化が消去される胎生12.5日の始原生殖細胞では核にJak2の局在は認められなかった。また、インプリンティングを獲得する生後5日から20日の卵成長期において、DNAのメチル化とJak2の核局在が同時期に認められることを明らかとした。これらのことから、核に局在するJak2はDNAのメチル化および脱メチル化に関連する機能を持つことが示唆された。

It is important for cell proliferation and differentiation, and it is important for acidifying enzymes. Report on the regulation of early embryonic embryos and growth factors of early stage embryos (Insulin, IGF-I, EGF, TGF-αなど).これらのAcceptor はチロシンリン acidifying enzyme activity をもち, early embryo のシグナル伝达に关与していると思われるが、その Function は4 cell stage and then において明らThe period before fertilization, the period before fertilization, and the 4-cell stage after fertilization.発生を Regulation するチロシンリン acidifying enzyme についての知见は得られていない.したがって, growth factor that regulates の発生をbefore 4-cell stage There is a possibility that the acidifying enzyme other than the acceptor can be tested.そこで, fertilization から4 cell stage の発生をregulation するチロシンリンacidifying enzyme を同定し, そのfunction を明らかにすることにより、マウスInitial embryonic development control mechanism を Explain the purpose of this research することを This research is carried out.これまでの実験から、マウスInitial embryonic acidase Jak2が発appearsしており、original シグナルを伝达するためにexisting near the cell membraneしているJak2 が が お よ び Chromosome に す る と い う 新码 の 知见 を 得 た こ と か ら、こThe function of the migration inside the core is the function of the movement.はじめに、Chromosome migrationのメカニズムを明らかにするために、 In the early stage of the 2-cell stage, Jak2's core is in the nucleus. Generally speaking, the chromosomes in the nucleus of the early 2-cell stage, where the sperm comes from, and the chromosomes where the egg comes from, are separated and separated.しかしながら, 1-cell stage におけるJak2 is specific for the female pronucleusであることから、Chromosome migration of sperm origin していることが考えられる.そこで、Jak2がSperm OriginのChromosome Migrationする Periodを AdjustmentべたResult、Medium PeriodのMedium PeriodからLater PeriodにかけてTransmigrationすることが明らかとなった.このperiodにはクロマチンstructuralに大きな変化が开きることが知られていることから.このことはMale pronucleus やNIH3T3 cell のNucleus をUnfertilized egg にTransplantation したcell では、Jak2 Chromosome にAccumulation しないことからも正かめられ、Jak2のchromosomeへのcumulationはクロマチンstructuralのviolationいにdependenceしていることがshowされた.つぎに, 内内におけるJak2の Function を明らかにするために, DNAのメチル化とのassociated を検证した. The DNA of the male pronucleus is excreted directly after fertilization. There is a possibility that the female pronucleus-specific NAJak2 is related to DNA DNA transformation.はじめにDNA メチル化が されるviviparous 12.5 days の primordial germ cell では にJak2 のbureau in は recognized められなかった.また, インプリンティングを got する5 days after birth and 20 days of egg growth period において, The nuclear agency of DNA のメチル化とJak2 was recognized at the same time as められることを明らかとした.これらのことから、NUCLEAR bureau in するJak2はDNAのメチルThe change of the function is related to the function of the change.

项目成果

Ito M, Nakasato M, Suzuki T, Sakai S, Nagata M, Aoki F.: "Localization of Janus Kinase 2 to the Nuclei of Mature Oocytes and Early Cleavage Stage Mouse Embryos."Biology of Reproduction. (掲載予定). (2004)

Ito M、Nakasato M、Suzuki T、Sakai S、Nagata M、Aoki F.：“Janus 激酶 2 在成熟卵母细胞和早期卵裂阶段小鼠胚胎细胞核中的定位”。（即将出版）。 2004年）