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植物マイコプラズマの形質転換系の確立

植物支原体转化体系的建立

基本信息

批准号：
01J06501
负责人：
柿澤茂行
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J06501/
关键词：
植物マイコプラズマ形質転換プラスミド

项目摘要

本研究は、形質転換系の確立していない植物マイコプラズマに対して、世界で始めて当研究室にて発見したRCR型植物マイコプラズマプラスミドを用いてベクターを開発し、植物マイコプラズマの形質転換系確立の技術基盤を構築することを目的としている。これまでの解析により、植物マイコプラズマのプラスミドに7つのORFが見いだされ、そのうち2つのみが既知の配列と相同性があることがわかっており(複製酵素:Rep、1本鎖DNA結合タンパク質:single-stranded DNA-binding protein)、さらに、複製酵素Repのタンパク質レベルでの発現が確認されたことにより、Repによりプラスミドの複製が行われている可能性が強く示唆された。また、他の微生物プラスミドとの構造比較により、複製酵素Repの周辺領域に複製起点が存在する可能性が示唆された。植物マイコプラズマのプラスミドにテトラサイクリン遺伝子を組み込み、感染昆虫より抽出したファイトプラズマ濃縮画分にエレクトロポレーション法によって導入した。導入した画分を媒介昆虫に注射して、続いて植物を吸汁させることによってファイトプラズマの形質転換を試みたが、陽性クローンは検出されなかったため、テトラサイクリン濃度や導入条件等のさらなる検討が必要であると考えられた。これらの条件は現在検討中である。また、感染昆虫より抽出したファイトプラズマ濃縮画分を、媒介昆虫に注射して戻し、続いて植物を吸汁させることによってファイトプラズマの継代接種を行うことが可能となった。

The purpose of this study is to make sure that there is a significant increase in the number of plants in this study, and that in the world, in the first place in the world, the laboratory has seen that RCR plants do not need to be treated in the first place, and that the purpose of this study is to improve the quality of the plant. This is the first time that we have known that the same ORF has been assigned to each other (enzyme: Rep, 1 copy of the DNA combined enzyme: single-stranded DNA-binding protein), that the enzyme, enzyme Rep may strongly indicate that it is possible to copy the line. There is a possibility that there is a possibility that there is a starting point for the production of microbes, microorganisms, microorganisms, micro Plants don't know what to do. They don't know what to do. They don't know if they're infected with insects. They don't know what to do. They don't know what to do. The insect vector is injected, the plant is sucked, the juice is sucked, the plant is sucked, the insect is injected, the plant is sucked, the insect is injected, the plant is sucked, the insect is sucked, the insect is injected, the insect is injected, the plant is sucked, the insect is sucked, the plant is sucked, the insect is sucked, the insect is injected, the plant is sucked, the juice is sucked, the plant is sucked, the insect is sucked, the insect is injected, the insect is injected, the plant is sucked, the juice is sucked, the plant is sucked, the insect is injected, the plant is sucked, the insect is sucked, the insect is injected, the plant is sucked, the insect is sucked, the insect is injected, the insect is injected, the plant is sucked, the The conditions are now in the middle. Infected insects are extracted from each other, and vector insects are used to inject juice into plants. It is possible to do so.