植物マイコプラズマの形質転換系確立の試み-新型プラスミドベクターの利用

植物支原体转化体系的尝试——新型质粒载体的使用

• 批准号: 12876009
• 负责人: 難波 成任
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12876009/
• 关键词: 動物マイコプラズマ; 植物マイコプラズマ; 変異株; 複製様式; 精製法; 細菌プラスミド; アコレプラズマ; 植物病原性微生物

植物マイコプラズマは世界に先駆けて我が国で発見された植物病原性微生物である。しかしその後、培養が困難であることから研究は進展せず、発生する植物の病気ごとに病原名が命名され、永年にわたりその分類は混沌としていた。数年前、我々は分子系統学的解析からMLOが動物マイコプラズマやスピロプラズマとは異なる微生物群であり、アコレプラズマに近縁で系統学的に大きな変異幅を有しながらも、一つの大きな微生物群であることを世界に先駆けて明らかにした。これを端緒に、その後1年足らずの間にこの種の研究が世界各国で急速に進展した。本研究では、植物マイコプラズマに、これまでのバクテリアでは見いだされたことのない新しいタイプのプラスミドを発見した。このプラスミドは、ローリングサークル型(Rolling-circle type)の複製様式の複製酵素(Rep)を持ったプラスミドであるが、同時に1本鎖DNA結合蛋白質(SSB)も持った、これまでの報告のないタイプの新型細菌プラスミドである。本研究では、このプラスミドを用いて、植物マイコプラズマの形質転換系の確立を目指種々の検討を行った。すなわち、植物マイコプラズマの各種変異株特異的なプラスミドの精製法を確立し、プラスミドの遺伝子構造を決定した。そして、データベースより複製起点、複製酵素など、各遺伝子の機能を解析した。そのデータをもとに、シャトルベクターを構築した。また植物マイコプラズマ精製分画にシャトルベクターを導入する条件を探索し、形質転換条件を検討した。

Plant pathogenic microorganisms are developed in the world It is difficult to cultivate and develop plant diseases. It is difficult to name and classify plant diseases. A few years ago, I analyzed the molecular systematics of animals, microbiota and microbiota. The research on this species has made rapid progress in all countries of the world in the past one year. This study is aimed at discovering new ways to improve the quality of plant life. The replication enzyme (Rep) of the Rolling-circle type was identified as a novel bacterial replicator and a locked-DNA binding protein (SSB) was identified as a novel replicator. This study aims to establish a morphological and qualitative transformation system for plant growth and development. The purification method of plant species with different plant species is established, and the genetic structure of plant species is determined. Analysis of replication origin, replication enzyme, and function of each gene The structure of the game is very simple. To explore the conditions of plant quality and classification

项目成果

Yamaji,Y.,Lu,X.,Kagiwada,S.,Oshima,K.and Namba,S.: "Molecular evidence that a lily-infecting strain of TBV from Japan is a new potyvirus."European Journal of Plant Pathology. (accepted). (2001)

Yamaji,Y.、Lu,X.、Kagiwada,S.、Oshima,K. 和 Namba,S.：“来自日本的百合感染 TBV 菌株是一种新的马铃薯病毒的分子证据。”欧洲植物病理学杂志。

Nishigawa,H.,Miyata,S.,Oshima,K.,Sawayanagi,T.,Komoto,A.,Kuboyama,T.,Matsuda,I.,Tsuchizaki,T.and Namba,S: "In planta expression of a protein encoded by the extrachromosomal DNA of phytoplasma and related to geminivirus replication proteins."Microbiology.

西川，H.，宫田，S.，大岛，K.，泽柳，T.，小本，A.，久保山，T.，松田，I.，土崎，T.和难波，S：“在植物中表达

Lu,X.,Hirata,H.,Ugaki,M.S.and Namba,S.: "Random mutagenesis in a plant viral genome using a DNA repair-deficient mutator Escherichia coli strain."Journal of Virological Methods. (in press). (2001)

Lu,X.、Hirata,H.、Ugaki,M.S. 和 Namba,S.：“使用 DNA 修复缺陷突变体大肠杆菌菌株对植物病毒基因组进行随机诱变。”病毒学方法杂志。