β-catenin結合因子の探索及びその機能解析

Wntシグナル伝達経路は、線虫からヒトにいたるまで広く保存されており、発生、形態形成に重要な役割を果たしている。さらに、種々のヒト腫瘍でWntシグナル伝達経路構成因子であるβ-cateninや負の制御因子APCの変異が見出され、Wntシグナル伝達経路の異常が細胞癌化に関与していることが明らかになっている。変異のおきたβ-cateninは安定化して細胞内に蓄積し、核内に移行してTCFと複合体を形成し転写を活性化する。このようなβ-catenin/TCFを介した転写の異常な活性化が癌化の一因となると考えられている。私は去年までに、β-cateninの機能による癌化の機構をさらに明らかにするためにβ-catenin結合因子を検索し、B細胞リンパ腫で活性化している癌遺伝子Bc19と相同性のある新規遺伝子B9L(Bcl9 like protein)を同定し、β-cateninを介した転写を亢進する活性を持つ事を明らかにしてきた。今年度はB9L及びBcl9の生理的機能を比較解析した。結果、B9LはXenopus初期胚に二次軸を誘導する活性をもつこと、変異β-cateninによるRK3E細胞の軟寒天上でのコロニー形成を促進する活性をもつことが明らかにした。B9LのC末端領域を欠損させたドミナントネガティブ変異体B9LΔCterは、β-cateninによるコロニー形成を顕著に減弱させた。一方、BCl9はβ-catenin結合能はもっているが、転写活性化能、二次軸誘導能のいずれも示さなかった。これらの結果より、B9LとBcl9には活性の違いが存在し、また、B9Lはβ-cateninの介した細胞癌化に関与している事を明らかにした。

Wntシグナル伝達経路は、線虫からヒトにいたるまで広く保存されており、発生、形態形成に重要な役割を果たしている。さらに、種々のヒト腫瘍でWntシグナル伝達経路構成因子であるβ-cateninや負の制御因子APCの変異が見出され、Wntシグナル伝達経路の異常が細胞癌化に関与していることが明らかになっている。変異のおきたβ-cateninは安定化して細胞内に蓄積し、核内に移行してTCFと複合体を形成し転写を活性化する。このようなβ-catenin/TCFを介した転写の異常な活性化が癌化の一因となると考えられている。私は去年までに、β-cateninの機能による癌化の機構をさらに明らかにするためにβ-catenin結合因子を検索し、B細胞リンパ腫で活性化している癌遺伝子Bc19と相同性のある新規遺伝子B9L(Bcl9 like protein)を同定し、β-cateninを介した転写を亢進する活性を持つ事を明らかにしてきた。今年度はB9L及びBcl9の生理的機能を比較解析した。結果、B9LはXenopus初期胚に二次軸を誘導する活性をもつこと、変異β-cateninによるRK3E細胞の軟寒天上でのコロニー形成を促進する活性をもつことが明らかにした。B9LのC末端領域を欠損させたドミナントネガティブ変異体B9LΔCterは、β-cateninによるコロニー形成を顕著に減弱させた。一方、BCl9はβ-catenin結合能はもっているが、転写活性化能、二次軸誘導能のいずれも示さなかった。これらの結果より、B9LとBcl9には活性の違いが存在し、また、B9Lはβ-cateninの介した細胞癌化に関与している事を明らかにした。