細胞増殖抑制Tobファミリー蛋白質の発生工学を用いた機能解析
使用发育工程对细胞生长抑制 Tob 家族蛋白进行功能分析
基本信息
- 批准号:01J60026
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2001
- 资助国家:日本
- 起止时间:2001 至 2002
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Tob、Tob2、BTG1、PC3、ANAで構成される新規ファミリー遺伝子産物は細胞増殖抑制をもち、細胞周期制御に重要な役割を持っていることが示唆されている。また、tob遺伝子欠損マウスは、加齢に伴う癌形成や、大理石骨病様の病態を示す。tob2遺伝子欠損による骨代謝への影響を調べる為、これまでに作製したtob/tob2 KOマウスを用い骨量解析を行った。その結果、tob遺伝子欠損マウスとは逆にtob/tob2 KOマウスでは、tob KOマウスとは反対に骨量が減少していた。また、tob2 KOマウスの骨髄を用いた分化誘導実験で、破骨細胞への分化の亢進が示された。今後、破骨細胞分化機構へのTob2の関わりについて解析を進めていく予定である。近年の解析により、Tobの増殖抑制活性の制御にはErk1/2によるTobのリン酸化が非常に重要な役割を果たしていることがわかってきた。このTobのErk1/2によるリン酸化部位は、Tob2において保存されている。そこで、血清もしくはPDGF刺激後のNIH3T3細胞の可溶化液を用い、Tob2のリン酸化についてウエスタンブロットにより解析したところ、刺激依存的にTob2のリン酸化による泳動度の変化が確認された。またこの泳動度の変化は細胞のMEKインヒビター(PD98059)処理により減弱することから、Tob2もTobと同様にErk1/2にリン酸化される可能性が示唆された。更に、Tob2がTobと同様にcyclin D1遺伝子の転写の抑制活性を持つか、cyclin D1遺伝子プロモーターのレポーターを用いて解析した。その結果、Tob2は発現量依存的にcyclin D1遺伝子プロモーターの転写活性を抑制することがわかった。
Tob, Tob2, BTG1, PC3, ANA で constitute さ れ る new rules フ ァ ミ リ ー heritage 伝 zi chan content raised colonization は cells inhibit を も ち, cell cycle cut を hold important な battle royal に っ て い る こ と が in stopping さ れ て い る. Youdaoplaceholder0, tob remnant 伝 seed deficiency occurs ウス す, plus 齢に accompanied by う cancer formation や, marble bone disease-like lesion を shows す. Tob2 heritage 伝 son owe loss に よ る bone metabolism へ の influence を adjustable べ る for, こ れ ま で に cropping し た tob/tob2 KO マ ウ ス を with い bone mass line analytical を っ た. そ の results, traces of tob 伝 son owe loss マ ウ ス と は inverse に tob/tob2 KO マ ウ ス で は, tob KO マ ウ ス と は anti polices に bone mass が reduce し て い た. Youdaoplaceholder0, tob2 KO ウス ウス of <s:1> bone marrow を induced by <s:1> た differentiation of experimental で and osteoclast へ <s:1> hyperdifferentiation <e:1> が showed された. In the future, the osteoclast differentiation mechanism へ <s:1> Tob2 <e:1> will be related to わ に に て て て analysis を into めて く く く to determine である. In recent years, analytical に の よ り, Tob の raised colonization inhibitory activity の suppression に は Erk1/2 に よ る Tob の リ ン acidification が very important な に "を cut fruit た し て い る こ と が わ か っ て き た. <s:1> <s:1> Tob <s:1> Erk1/2によるリ <s:1> acidified site, Tob2にお て て て て preserve されて る る る. そ こ で, serum も し く は PDGF stimulation の の NIH3T3 cells can be melted liquid を with い, Tob2 の リ ン acidification に つ い て ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト に よ り parsing し た と こ ろ, stimulate the interdependent に Tob2 の リ ン acidification に よ の る swimming degrees - the が confirm さ れ た. ま た こ の の swimming degrees - the は cells の MEK イ ン ヒ ビ タ ー (PD98059) 処 Richard に よ り abate す る こ と か ら, Tob2 も Tob と with others に Erk1/2 に リ ン acidification さ れ が る possibility in stopping さ れ た. With others in more に, Tob2 が Tob と に cyclin D1 heritage 伝 son の planning write の inhibitory activity を hold つ か, cyclin D1 heritage 伝 son プ ロ モ ー タ ー の レ ポ ー タ ー を with い て parsing し た. そ の results, Tob2 は 発 now quantity dependent に cyclin D1 heritage 伝 son プ ロ モ ー タ ー の planning write inhibition す を る こ と が わ か っ た.
项目成果
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