新規がん抑制遺伝子産物MY018Bのがん悪性化における機能解析

新型抑癌基因产物MY018B在恶性肿瘤中的功能分析

• 批准号: 03J01450
• 负责人: 安島 理恵子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J01450/
• 关键词: MYO18B; ミオシン; 心筋; アクチン鎖; 中心体; がん抑制遺伝子; アクチン; 筋肉; 心臓

新規ミオシンファミリータンパク質をコードするMYO18B遺伝子は、ヒト肺がん細胞で高頻度に失活しており、新規がん抑制遺伝子である可能性が示唆されている。MYO18Bの個体における機能を解析する為、ジーンターゲティング法を用い、MYO18B遺伝子のプロモーターの下流にβ-gal遺伝子を挿入し、遺伝子欠損マウスを作成した。ヘテロマウスを用いたLacZ染色により、MYO18Bは骨格筋、心筋に強い発現することがわかった。MYO18B遺伝子のプロモーターの解析により、筋細胞におけるMYO18B遺伝子の発現に、転写因子MEF2が寄与することが示唆された。ヘテロマウス同士の掛け合わせにより得られる胎児の解析により、MYO18Bノックアウトマウスは、心筋細胞のサルコメア構造の異常により、受精後10-12日目に致死になることがわかった。以上の結果よりMYO18Bは心筋の発生・機能において重要な役割を担っていることが示された。MYO18B遺伝子産物の細胞内における機能を解析する為、MYO18Bの細胞内局在の解析を行った。細胞に導入したMYO18Bはアクチン鎖上および中心体に局在が確認された。更にMYO18Bのアクチン鎖及び中心体への局在に必要な部位を同定する為、MYO18Bの欠失変異体の細胞内局在を解析した。その結果、MYO18BのN末端側半分がアクチン鎖上の局在に、C末端側半分の領域がMYO18Bの中心体への局在に必要なことがわかった。NIH3T3細胞にMYO18BおよびMYO18Bの欠失変異体を導入したところ、MYO18B C末端側領域の過剰発現により中心体の数の増加が認められた。以上の結果より、MYO18Bは中心体の数を保つ機能を有し、MYO18B C末端側領域がドミナントネガティブに働くことによりその機能が阻害され、中心体の数の増加を引き起こす可能性が示唆された。

New rules ミ オ シ ン フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク qualitative を コ ー ド す る MYO18B heritage 伝 は, ヒ ト lung が で high frequency に ん cell inactivation し て お り, new rules が ん inhibit heritage 伝 son で あ が る possibility in stopping さ れ て い る. Function of individual MYO18B の に お け る を parsing す る for, ジ ー ン タ ー ゲ テ ィ ン グ method を い, MYO18B heritage 伝 son の プ ロ モ ー タ ー の obscene に beta gal heritage 伝 son を scions into し, heritage 伝 son owe loss マ ウ ス を made し た. Youdaoplaceholder0 ヘテロ ウスを staining with ヘテロ たLacZ results in によ, MYO18B する bone sinew and heart sinew に strong に occurrence する する とがわ った った った った った った. MYO18B posthumous son 伝 の プ ロ モ ー タ ー の parsing に よ り, muscle cells に お け る MYO18B heritage 伝 son の 発 に now, planning to write factor MEF2 が send す る こ と が in stopping さ れ た. ヘ テ ロ マ ウ ス わ association with James の hang け せ に よ り have ら れ る tire where の parsing に よ り, MYO18B ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス は, heart muscle cells の サ ル コ メ ア abnormal structure の に よ り, 10 to 12 days after fertilization に death に な る こ と が わ か っ た. の above results よ り MYO18B は heart muscle の 発 raw, functional に お い cut を bear っ て important な service て い る こ と が shown さ れ た. MYO18B 伝 progeny <s:1> intracellular における function を analysis する is, MYO18B <s:1> intracellular localization を analysis を row った. Cells に are introduced into た たMYO18B ア ア チ <s:1> locked onto および centrosomes に in が for confirmation された. More に MYO18B の ア ク チ ン lock and び centrosome へ の bureau in に を な parts with necessary す る for, MYO18B の owe lost - variant の cells inside bureau in analytical し を た. そ の results, MYO18B の N terminal side half が ア ク チ ン locked の bureau in the field of に, C terminal side half points の が MYO18B の centrosome へ の bureau in に necessary な こ と が わ か っ た. NIH3T3 cells にMYO18BおよびMYO18B <s:1> undermutated variant を introduction <s:1> たと によ ろ ろ MYO18B c-terminal domain <s:1> excessive occurrence によ <s:1> the number of <s:1> centrosome <e:1> <e:1> increase が recognized められた. の above results よ り, MYO18B は centrosome number の を つ function を し, bao MYO18B C terminal side field が ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ に 働 く こ と に よ り そ の function が resistance against さ れ, centrosome number の の rights and an を lead き こ が す possibility in stopping さ れ た.