モデル動物を用いた副腎白質ジストロフィーの病態解明と治療への応用

使用模型动物阐明肾上腺脑白质营养不良的病理学及其在治疗中的应用

• 批准号: 12670610
• 负责人: 山田 猛
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12670610/
• 关键词: 副腎白質ジストロフィー; 培養細胞; 極長鎖脂肪酸; 細胞接触; β酸化

[目的] 副腎白質ジストロフィー(ALD)の治療法としては、早期の骨髄移植の有用性が示されている。骨髄移植の治療効果の発現機構を明らかにするために、正常細胞がALD細胞の代謝障害を是正するかどうかを調べた。[方法] ALD患者由来の線維芽細胞163T(G418耐性)とマウスのミクログリア細胞株N9を混合培養、または両細胞をフィルターで分離して培養した。1週間後にG418によりN9のみを除去した。回収した163T細胞の極長鎖脂肪酸(VLCFA)をHPLCにより分析した。混合培養後の163T細胞のリグノセリン酸β酸化活性を測定した。また、ALD蛋白をウエスタンブロットにより調べた。[結果] C26:0/C22:0の割合は163TとN9の細胞数を1:1および1:10で混合培養した場合、0.50および0.54と対照163Tの0.88に比して有意に低下していた。フィルターで分離して培養した場合には0.84であり、対照と有意差を認めなかった。163T細胞のリグノセリン酸β酸化活性の低下は混合培養により改善しなかった。ALD蛋白は混合培養後の163T細胞には検出されなかった。[結論] 正常細胞はALD細胞のVLCFA蓄積を改善するが、その効果は液性因子によるものではなく細胞接触によって得られる。ALD蛋白が正常細胞からALD細胞に移入されることはない。

[Objective] To explore the therapeutic methods of accessory kidney disease (ALD) and to demonstrate the usefulness of early bone transplantation. The mechanism for the development of therapeutic effects of bone transplants is clearly defined, and the metabolic barriers of normal cells and ALD cells are regulated. [Methods] ALD patients derived from line 163T cells (G418 tolerance) and their cells were cultured in a mixture of N9 cells and isolated in a culture medium. A week later, G418 was removed. Analysis of Very Long Chain Fatty Acids (VLCFA) in 163T Cells by HPLC 163T cells were cultured in mixed culture and their β-acidification activity was measured. Alder, Alder [Results] The cell number of C26:0/C22:0 was 1:1 and 1:10 respectively. In mixed culture, the cell number of C26: 0/C22: 0 was 0.50 and 0.54 respectively. For example, if you want to separate, you can choose 0.84. 163T cell proliferation was improved by mixed culture. ALD protein was found in 163T cells after mixed culture. [Conclusion] The accumulation of VLCFA in ALD cells was improved in normal cells. ALD protein is transferred from normal cells to ALD cells.

项目成果

Yamada T, et al: "Very long-chain fatty acid metabolism in adrenoleukodystrophy protein-deficient mice"Cell Biochem Biophys. 32. 239-246 (2000)

Yamada T 等人：“肾上腺脑白质营养不良蛋白缺陷小鼠的极长链脂肪酸代谢”Cell Biochem Biophys。

Yamada T, et al: "Lovasatitin does not correct the accumulation of very long-chain fatty acids in tissues of adrenoleukodystrophy protein-deficient mice"J Inher Metab dis. 23. 607-614 (2000)

Yamada T 等人：“洛伐沙丁不能纠正肾上腺脑白质营养不良蛋白缺陷小鼠组织中极长链脂肪酸的积累”J Inher Metab dis。