分裂組織からの器官分化過程におけるシスタチオニンγ-シンターゼmRNA安定性制御

分生组织器官分化过程中胱硫醚 γ-合酶 mRNA 稳定性的调节

• 批准号: 13017201
• 负责人: 尾之内 均
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13017201/
• 关键词: シスタチオニンγ-シンターゼ; mRNA安定性; メチオニン; S-アデノシルメチオニン; シロイヌナズナ; in vitro翻訳系

シスタチオニンγ-シンターゼ(CGS) mRNAの安定性制御機構を解明する目的で、この制御のエフェクター分子の同定を行った。小麦胚芽由来のin vitro翻訳系を用いたアッセイによって、メチオニンの代謝産物についてエフェクターとしての効果を調べたところ、S-アデノシルメチオニン(SAM)のみが効果を示し、SAMがCGS mRNA安定性制御のエフェクター分子であることが強く示唆された。また、SAMを基質とするメチル基転位酵素の競争阻害剤であるS-アデノシルホモシステインは、SAMの効果を阻害しなかった。このことから、SAMの効果はメチル基転位反応によるものではないことが示唆された。また、SAMのアナログについても、同じin vitroアッセイを用いて、CGS mRNA安定性制御のエフェクターとしての効果を調べた。その結果、SAMのメチル基をエチル基に置換したS-アデノシルエチオニン(SAE)も、SAMと同様の効果を示した。一方、SAMからメチル基を除いたS-アデノシルホモシステインは効果を示さなかった。したがって、SAMとSAEに共通する構造的特徴あるいは硫黄原子にアルキル基が付加することによって生じる正電荷が重要である可能性が考えられる。また、in vitro翻訳系を用いて、翻訳反応後のRNA分解中間体の解析を行った。これまでにin vivoの実験系でみられたのと同様の5'側を400塩基ほど欠いたRNAがノーザン解析により検出され、また、5'側領域のハイブリッドセレクションにより、350塩基程度の短いRNAがSAM存在下で特異的に検出された。これらの結果から、エンドリボヌクレアーゼがこの制御に関与することが示唆される。

シ ス タ チ オ ニ ン gamma シ ン タ ー ゼ (CGS) mRNA の stability system of the royal institution を interpret す る purpose で, こ の suppression の エ フ ェ ク タ の ー molecules with fixed line を っ た. Wheat germ origin の in vitro turn を 訳 department with い た ア ッ セ イ に よ っ て, メ チ オ ニ ン の metabolites に つ い て エ フ ェ ク タ ー と し て の unseen fruit を adjustable べ た と こ ろ, S - ア デ ノ シ ル メ チ オ ニ ン (SAM) の み が unseen fruit を し, SAM が CGS mRNA stability control is controlled by エフェ, タ, タ molecules である, <s:1>, とが strong く hints された. ま た, SAM を matrix と す る メ チ ル base planning an enzyme の competition resistance against tonic で あ る S - ア デ ノ シ ル ホ モ シ ス テ イ ン は, SAM の unseen fruit を resistance against し な か っ た. こ の こ と か ら, SAM の unseen fruit は メ チ ル base planning a reverse 応 に よ る も の で は な い こ と が in stopping さ れ た. ま た, SAM の ア ナ ロ グ に つ い て も, with じ in vitro ア ッ セ イ を with い て, CGS mRNA stability suppression の エ フ ェ ク タ ー と し て の unseen fruit を adjustable べ た. そ の results, SAM の メ チ ル base を エ チ ル base に replacement し た S - ア デ ノ シ ル エ チ オ ニ ン (SAE) も, SAM と with others の unseen fruit を shown し た. One party, SAM アデノシ らメチ を basis を division of た た s-ア デノシ ホモシステ ホモシステ <s:1> を を を effect を shows さな った った った. し た が っ て, SAM と SAE に common す る structure of 徴 あ る い は sulfur atoms に ア ル キ ル base pay plus す が る こ と に よ っ て raw じ る positive charge が important で あ る possibility が exam え ら れ る. Youdaoplaceholder0, in vitro, 訳 is を, て て, 訳 reverse 応, <s:1> RNA decomposition intermediate <s:1> parse を line った. こ れ ま で に in vivo の be 験 department で み ら れ た の と with others の 5 '400 salt base side を ほ ど owe い た RNA が ノ ー ザ ン parsing に よ り 検 out さ れ, ま た, 5' side of the field の ハ イ ブ リ ッ ド セ レ ク シ ョ ン に よ り, short 350 degree of salt base の い RNA が SAM で in the presence of specific に 検 out さ れ た. こ れ ら の results か ら, エ ン ド リ ボ ヌ ク レ ア ー ゼ が こ の suppression に masato and す る こ と が in stopping さ れ る.

项目成果

Akinori Suzuki: "The first exon coding region or cystathionine γ-synthase gene is necessary and sufficient for downregulation of its own mRNA accumulation in transgenic Arabidopsis thaliana"Plant and Cell Physioly. 42(10). 1174-1180 (2001)

Akinori Suzuki：“第一个外显子编码区或胱硫醚 γ-合酶基因对于转基因拟南芥中其自身 mRNA 积累的下调是必要且充分的”Plant and Cell Physioly 42(10)。

Paula Suarez-Lopez: "CONSTANS mediates between the circadian click and the control of flowering in Arabidopsis"Nature. 410(6832). 1116-1120 (2001)

Paula Suarez-Lopez：“CONSTANS 在拟南芥的昼夜节律和开花控制之间发挥作用”自然。

Kazuhiro Tanaka: "A subtilisin-like serine protease is required for epidermal surface formation in Arabidopsis embryos and juvenile plants"Development. 28(23). 4681-4689 (2001)

Kazuhiro Tanaka：“拟南芥胚胎和幼年植物的表皮表面形成需要一种枯草杆菌蛋白酶样丝氨酸蛋白酶”的开发。

Endang Semiarti: "The transposition pattern of the AC element in tobacco cultured cells"Genes & Genetic Systems. 76(2). 131-139 (2001)

Endang Semiarti：“烟草培养细胞中 AC 元件的转座模式”基因