ホメオドメイン転写因子SIX1の血液細胞周期および分化制御機構

同源域转录因子SIX1的血细胞周期和分化控制机制

• 批准号: 13043045
• 负责人: 池田 啓子
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13043045/
• 关键词: SIX1; 細胞周期; 血球分化; マイクロアレイ; 細胞増殖

転写因子Sixタンパク質の細胞周期への役割を明らかにすることを目的とした。成果(1)血球細胞分化Lineageに伴うSIX1発現の消長。成人骨髄から、造血幹細胞を採取し、種々の薬剤により分化を誘導した場合に内因性SIX1発現の変化をRT-PCR法にて検証した。SIX1は未分化細胞で少量発現し、赤血球、巨核球いずれの分化系列においても、分化刺激後2日目でその発現が増加し、4日目で多少低下した後、6日目で、再び発現が顕著に増大した。なお、細胞は分化刺激後6日目においては、分化系列が進行する一方、増殖能も増加していた。成果(2)血球系細胞株における発現。HL60(C)細胞株では増殖培地下で強発現が観察された。HL60(C)はPDBuまたはAraCにより分化を誘導し、誘導開始後1,2,3,4日目の細胞からmRNAを調製しノザン法にてSIX1の発現量を調べた。分化誘導・増殖能消失と同時に顕著にSIX1の発現レベルが顕著に低下した。この現象は赤血球、巨核球等の分化系譜にはよらなかった。これらの細胞株は、分化とともに増殖能が低下する。成果(3)血球系細胞株へのSIX1の強制発現による増殖能の変化。SIX1の強発現に用いる、野生型および、DNA結合能を欠く変異型を作成し、K562細胞に形質転換を行った。この際、SIX1遺伝子産物を発現する細胞は、同時にGFP遺伝子産物を発現させ、GFP陽性細胞群について、細胞周期を調べた。SIX1の強制発現により、S期の優位な増加が観察された。DNA結合能を欠く変異型SIX1も野生型と同程度のS期の優位な増加が観察された。さらに細胞同士の接着性の増加が観察された。成果(4)標的遺伝子の同定。野生型SIX1の強制発現株のマイクロアレイにより、種々のサイトカインや接着因子の有意な発現増強が観察された。

The cell cycle of the Six Factor is regulated by the regulation of cell cycle activity. Results (1) Lineage of hemocyte differentiation accompanied by SIX1 evolution. Adult bone marrow, hematopoietic stem cells, differentiation induction, endogenous SIX1 development, RT-PCR SIX1 showed a small amount of undifferentiated cells, erythrocytes and megakaryocytes in the differentiated series, increased in number 2 days after differentiation stimulation, decreased in number 4 days after differentiation stimulation, and increased in number 6 days after differentiation stimulation. 6 days after the differentiation stimulation, the differentiation series was carried out, and the proliferation ability was increased. Results (2) Hematopoietic cell lines developed rapidly. HL60 (C) cell line was cultured in vitro and was observed to be strongly expressed. HL60 (C) was induced to differentiate from AraC by PDBu, and the expression of SIX1 was modulated 1, 2, 3, and 4 days after induction. Differentiation induction, proliferation, disappearance, and development of SIX1 are also observed. This phenomenon is related to the differentiation of erythrocytes, megakaryocytes, etc. The cell lines were differentiated and proliferated. Results (3) Transformation of proliferation ability in SIX1 cell line under stress. SIX1 strong expression in the middle, wild type, DNA binding ability to create a different type, K562 cells in the form of transformation At the same time, SIX1 gene product development in cells, GFP gene product development, GFP positive cell population development, cell cycle regulation The stress occurrence of SIX1 and the enhancement of S phase were observed. DNA binding energy was observed to be increased between wild type and S phase heteromorphic SIX1. The increase in cell adhesion was observed today. Results (4) The identification of target genes. Intentional enhancement of the expression of stress emergent elements in wild-type SIX1 was observed.

项目成果

Ozaki, H., et.al.: "Impaired interactions between mouse Eya1 harboring mutations found in patients with branchio-oto-renal syndrome and Six, Dach, and G proteins"J.Hum.Genet.. (in press). (2002)

Ozaki, H. 等人：“在鳃耳肾综合征患者中发现的携带突变的小鼠 Eya1 与 6、Dach 和 G 蛋白之间的相互作用受损”J.Hum.Genet..（出版中）。

Ikeda, K., et.al.: "The H1 and H2 regions of the activation domain of herpes simplex virion protein 16 stimulate transcription through distinct molecular mechanisms"Genes to Cells. 7. 49-58 (2002)

Ikeda, K. 等人：“单纯疱疹病毒粒子蛋白 16 激活域的 H1 和 H2 区域通过不同的分子机制刺激转录”《基因到细胞》。

Otsuki, T., et.al.: "Fanconi anemia protein, FANCA, associates with BRG1, a component of the human SWI/SNF complex"Hum.Mol.Genet.. 10(23). 2651-2660 (2001)

Otsuki, T. 等人：“范可尼贫血蛋白 FANCA 与 BRG1 相关，BRG1 是人类 SWI/SNF 复合物的一个组成部分”Hum.Mol.Genet.. 10(23)。