マシャド・ジョセフ病における神経細胞死選択性の基礎研究

马查多-约瑟夫病神经细胞死亡选择性的基础研究

• 批准号: 13210018
• 负责人: 吉澤 利弘
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13210018/
• 关键词: ポリグルタミン病; 細胞死; 凝集体形成; ataxin-3; P19細胞; マシャド・ジョセフ病

ポリグルタミン病の発症を考える上では、各疾患共通の細胞死機構と同時に各疾患固有の障害部位を決定している機構を知ることが重要である。我々は神経細胞集団における障害の選択性を知るための基礎研究として、 (1)異常ataxin-3フラグメントによる凝集体形成と細胞死を種々の培養細胞系で比較すること(2)異常並びに正常ataxin-3の全長を安定に発現するP19細胞株を作成すること、を中心に研究を行った。まずポリグルタミン鎖が77個に伸長しN末側の286個のアミノ酸を欠失したataxin-3を8種の培養細胞(HeLa、Swiss/3T3、P19、C2C12、COS-1、BHK-21、PC12、Neuro2a)に増殖条件下で発現させた場合の凝集体形成と細胞死頻度の検討ではすべての細胞株に凝集体形成と細胞死が観察されたが、それぞれの頻度には細胞株間で大きな差があり、各細胞株においてこの両者の間に明確な相関を認めなかった。この差が細胞内シャペロン系応答やユビキチン-プロテアソーム系の処理能力の差によるものなのか等を今後検討する予定である。また異常並びに正常ataxin-3の全長を安定に発現するP19細胞株を複数作成し、レチノイン酸処理にて神経およびグリアへの分化を誘導し、その影響を評価した。その結果、正常ataxin-3発現株ではMAP-2免疫染色で検出される多数の長い突起を持った神経細胞とグリア系と考えられる細胞が形成されたが、異常ataxin-3発現株ではMAP-2陽性細胞が少なくまた突起の形成が極めて不良であった。今後、この系をモデルとしてさらに解析を行う予定である。

The mechanism of cell death common to all diseases and the mechanism of damage inherent in each disease are important to the development of diseases. We conducted basic research on the selection of abnormal ataxin-3 in cultured cell lines,(1) comparison of abnormal ataxin-3 in cultured cell lines,(2) establishment of a P19 cell line for the stable development of abnormal and normal ataxin-3 in cultured cell lines, and (3) central research. 77 cell lines were isolated from the cell line, 286 from the terminal, and 8 from the cell line.(HeLa, Swiss/3T3, P19, C2C12, COS-1, BHK-21, PC-12, Neuro-2a) Under the condition of culture, the aggregation formation and cell death frequency in the cell lines were investigated. Each cell strain is clearly related to each other. This difference in intracellular processing capacity is due to a change in the processing capacity of the system. P19 cell line with abnormal and normal ataxin-3 was induced by multiple production and acid treatment. The normal ataxin-3-producing strain was found to have MAP-2 positive cells, but the abnormal ataxin-3-producing strain was found to have MAP-2 positive cells. In the future, the system will be analyzed and determined.

项目成果

Yoshizawa T: "Compound heterozygosity with 2 novel mutations in the HEXB gene produces adult Sandhoff disease presenting as a MND phenotype"J Neurol Sci. (in press).

Yoshizawa T：“HEXB 基因中具有 2 个新突变的复合杂合性产生了表现为 MND 表型的成人桑德霍夫病”J Neurol Sci。

Yoshizawa T: "Differential susceptibility of cultured cells to aggregate formation and death by the truncated Machado-Joseph disease gene product"Brain Res Bull. 56. 349-352 (2001)

Yoshizawa T：“培养细胞对截短的马查多-约瑟夫病基因产物聚集体形成和死亡的不同易感性”Brain Res Bull。

Hatakeyama S: "Differential nociceptive response in mice lacking the alpha1B subunit of N-type Ca2+ channels"Neuroreport. 12. 2423-2427 (2001)

Hatakeyama S：“缺乏 N 型 Ca2 通道 α1B 亚基的小鼠的不同伤害感受反应”Neuroreport。

Ohye T: "A new splicing variant for human tyrosine hydroxylase in the adrenal medulla"Neurosci Lett. 312. 157-160 (2001)

Ohye T：“肾上腺髓质中人酪氨酸羟化酶的新剪接变体”Neurosci Lett。