权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

嗅覚受容体の発現に依存した嗅覚神経回路形成の分子機構

嗅觉神经回路形成依赖于嗅觉受体表达的分子机制

基本信息

批准号：
13210028
负责人：
坪井昭夫
金额：
$ 5.76万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者らは、嗅細胞における嗅覚受容体遺伝子の相互排他的な発現、及び、それに依存して生じる嗅球への位置特異的な軸索投射の分子機構を解明する為、長年の懸案であったトランスジェニックマウスにおける嗅覚受容体遺伝子の発現系の確立を試み、YAC(yeast artificial chromosome)ベクターを用いることにより世界に先駆けて成功した(Nat. Neurosci. 3:687-693,2000)。我々の作製したマウスにおいては、460kbのYAC DNA上の嗅覚受容体遺伝子MOR28はIRES (internal ribosome entry site)を介してtau-lacZ遺伝子により標識されており、内在性のMOR28遺伝子は外来性の遺伝子を発現する細胞と区別する為、ノックインの手法を用いてIRES-gap-GFP遺伝子により標識されている。本研究において、このマウスを詳細に解析した結果、(1)外来性及び内在性のMOR28遺伝子は個々の嗅細胞で相互排他的に発現すること、(2)外来性或いは内在性の遺伝子を発現する嗅細胞の投射先は隣接しているが異なる糸球であること、(3)それぞれの遺伝子を発現する嗅細胞の軸索の選別と収斂はpathfindingの過程ではなく、糸球構造の形成に伴って生じることが明らかとなった。また、嗅細胞の嗅球への軸索投射に関して、トランスジェニック・ノックインマウスを用いて解析したところ、嗅覚受容体遺伝子の遺伝的背景、遺伝子標識の種類、染色体上での位置などが、軸索投射を規定するパラメーターになり得ることが示唆された。次に本研究では、これ迄の解析からMOR28遺伝子の発現制御には、その上流約100kbのDNA領域が重要であることが示されているので、この領域に予想される制御エレメントを、様々な欠失を導入することにより絞り込んでいる。最近、マウスとヒトのゲノムプロジェクトにおいて、MOR28及びそのヒトortholog遺伝子クラスター領域に関するDNA塩基配列がそれぞれ決定され、私共の解析により、MOR28遺伝子の転写開始点上流約70kbに、唯一、双方で相同性の高い2kbの領域が同定された。興味深いことに、MOR28遺伝子の上流に存在するこの相同性領域を欠失させたトランスジェニックマウスでは、このクラスターに属する3つの受容体遺伝子の発現が同時に消失した。この観察は、嗅覚受容体遺伝子の発現がクラスターのレベルで制御されており、一つの受容体遺伝子が選択される前に、一つのクラスターがchoiceされる可能性を示唆している。

Applicant: To elucidate the molecular mechanism for the development of mutually exclusive olfactory receptor proteins in olfactory cells and their dependence on olfactory bulb location-specific axonal projection; to establish a long-standing trial for the development of olfactory receptor proteins; to establish a YAC(yeast artificial chromosome) system; and to establish a world-leading success (Nat. Neurosci. 3:687-693,2000)。The olfactory receptor gene MOR28 on the 460kb YAC DNA was identified as an IRES (internal ribosome entry site) gene by using an IRES-gap-GFP gene marker. The results of this study were analyzed in detail: (1) the development of mutually exclusive MOR28 genes in olfactory cells;(2) the development of projections from olfactory cells prior to the development of exogenous MOR28 genes; and (3) the selection and pathfinding of axons in olfactory cells prior to the development of exogenous MOR 28 genes. The formation of spherical structures is accompanied by the formation of spherical structures. The axonal projection of olfactory bulb in olfactory cells is related to the analysis of the background of olfactory receptor gene, the type of gene marker, the position on chromosome, and the regulation of axonal projection. In this study, we analyzed the molecular structure of MOR28 gene and found that it was important to study the molecular structure of MOR 28 gene in the upper 100kb DNA domain. Recently, the DNA sequence of MOR28 and MOR 28 genes has been determined in the domain of MOR28 and MOR28 genes. The sequence of MOR 28 genes has been determined in the domain of MOR 28 genes. The sequence of MOR28 genes is about 70kb upstream from the start point of writing. The sequence of MOR28 genes is unique and has a high similarity of 2 kb. The presence and absence of MOR28 gene in the upstream region of interest and identity domain are not complete. The possibility of detecting and smelling the occurrence of the receptor gene, controlling the receptor gene, selecting the receptor gene, and selecting the receptor gene is indicated.