バンコマイシン耐性腸球菌の新たな高頻度接合伝達性プラスミドの研究

新型耐万古霉素肠球菌超接合传播质粒的研究

• 批准号: 13226009
• 负责人: 富田 治芳
• 金额: --
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226009/
• 关键词: 腸球菌; 薬剤耐性; ゲンタマイシン耐性; バンコマイシン耐性; 高頻度接合伝達; 伝達性プラスミド

本年度は米国のVREに存在する主要な2種類の高頻度接合伝達性ゲンタマイシン耐性プラスミドと、我が国のVREから分離された高頻度接合伝達性プラスミドの分子遺伝学的研究を行い、以下の成果を得た。A.ゲンタマイシン耐性高頻度接合伝達性プラスミドの解析1)米国のE. faecium VREから5種類の高頻度接合伝達性ゲンタマイシン高度耐性プラスミド(A〜Eタイプ)を単離した。接合伝達性及びDNA相同性等の解析の結果、これらは最近我々が報告した、新たな高頻度接合伝達性ゲンタマイシン耐性プラスミドpMG1と類似のプラスミドであった。最も多く存在したA、BタイプについてトランスポゾンTn9171acを用いた変異株を各々約1000個作製した。伝達実験の結果、数十個の非伝達性変異プラスミドが得られた。現在これらの変異株について遺伝学的な解析を行っている。2)共存する非伝達性バンコマイシン耐性プラスミドへの影響実験的に、ゲンタマイシン耐性伝達性プラスミドは非伝達性バンコマイシンプラスミドpIP816を固形培地上で伝達させた。この機構はプラスミドの可動化と、2つのプラスミドの融合による伝達が関与していた。3)共存する低頻度伝達性バンコマイシン耐性プラスミドの伝達性への影響米国のE. faecium VREから、固形培地上で伝達可能なバンコマイシン耐性プラスミドを複数単離した。ゲンタマイシン耐性プラスミドが一部のバンコマイシン耐性プラスミドの伝達頻度を高めることを実験的に示した。B.日本のVREから分離された高頻度接合伝達性プラスミドの解析日本国内で分離されたE. faecium VREから高頻度接合伝達性プラスミドを3種類(A〜Cタイプ)単離した。これらはいずれもpMG1と類似のプラスミドであった。各々のプラスミドの制限酵素地図を決定したところ(64〜68kb)、それらは構造が一部異なるが、互いに類似していた。Aタイプのプラスミドを用い、トランスポゾンTn917lacによる挿入変異プラスミドを約1000個作製し、45個の伝達性変異プラスミドを得た。それらのトランスポゾンの挿入部位を解析した結果、プラスミド上の約3分の2以上の領域が伝達に関与していると考えられた。この領域を含む一部の塩基配列を決定し、変異株についての遺伝学的解析を行っている。

This year, we conducted molecular genetic research on the presence of two main types of high frequency conjugative reachability, isolation of VRE and high frequency conjugative reachability in China. The following results were obtained. A. Analysis of high frequency conjugative resistance to high frequency conjugative resistance 1) Analysis of Faecium VRE has five types of high frequency conjugations, and the highest resistance is the highest. The results of the analysis of conjugal reachability and DNA identity are as follows: 1. There are about 1000 plants each in the most common A and B plants. As a result, dozens of non-expressive variants have been discovered. Now, the analysis of genetic studies has been carried out in different plants. 2)Blue shift non-invasive disease resistance test results affect the development of disease, disease resistance test results, non-invasive disease resistance test results, pIP816 solid culture results. This mechanism is based on mobility, integration, and integration. 3)The blue shift of low frequency reachability and resistance of high frequency reachability affect the E. faecium VRE, solid culture ground can be reached by a variety of methods. The number of times a patient has to be treated is higher than the number of times a patient is treated. B. Japan's VRE separation from the high frequency of joint transmission and analysis of Japan's domestic separation from the E. Faecium VRE is a high frequency joint. There are three types of high frequency joints (A ~ C). This is the first time I've ever seen a woman. The restriction enzymes of each species are determined by the length of the enzyme (64 ~ 68kb), and the structure of the enzyme is similar to each other. A: About 1000 system and 45 system applications are available. The results of the analysis of the penetration position of the sample are about 3 minutes and more than 2 minutes. This domain includes a part of the base alignment determination, and the genetic analysis of different plants.