ヘリコバクター・ピロリ外膜蛋白の構造の多様性と免疫回避機構

幽门螺杆菌外膜蛋白的结构多样性及免疫逃避机制

• 批准号: 13226104
• 负责人: 西園 晃
• 金额: --
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226104/
• 关键词: 遺伝子; 感染症; 細菌; 微生物; ヘリコバクター・ピロリ

ヘリコバクター・ピロリ菌の外膜蛋白Omp29のN末端アミノ酸配列を決定し、Omp29遺伝子の分離株間での多様性と発現蛋白の抗原性について検討することを今回の目的とした。分離・精製された分子量29KDaの蛋白分画のN末端アミノ酸配列は26695株のHP78及びJ99株のJHP73遺伝子のN末端配列と同一であった。臨床分離株150例から抽出したDNAをPCRを用いて検討した結果、増幅産物は長さにより770bp、770bp以上の2群に分類され150例5例と76例であった。Omp29遺伝子の構造について短い770bp群は互いにほぼ同じ配列であったのに対し、長いサイズ群は保存された配列の間に5'末端から180bpの位置に、762bp〜1264bpと種々の長さで保存性の低い配列が挿入された構造となっていた。挿入された異なる配列の5'及び3'末端には17bpから成る同方向配列が各々確認された。また各遺伝子のORF構造は770bp群では単一ORFであるのに対し、長いサイズ群では数個のORFに分断されていた。組み換えOmp29蛋白に対するウサギ抗血清を用いたimmunoblotでは、単一のORFから成る770bp群では29kDaの位置に反応が見られたが、長いサイズ群ではORFが分断されているために反応は認めなかった。一方、Omp29発現蛋白を抗原として患者血清中の抗体保有の有無を確認したところ、全ての患者に29kDaの反応物を確認できた。Omp29遺伝子配列中には、2箇所の17bpから成る繰り返し配列が存在し、この間に挿入された塩基配列の長さの違いでゲノム全体の長さが変化するような新規の挿入・脱落機序が存在する事が予想された。このようなメカニズムによりH.pyloriゲノムの変異から、抗原性の変化、さらには宿主の免疫監視機構からの回避により持続感染に至ることが予想された。

ヘ リ コ バ ク タ ー · ピ ロ リ bacteria の outer membrane protein Omp29 の N terminal ア ミ ノ acid with column を decided し, Omp29 but 伝 の separation between strains で の multiple others と 発 antigenic protein is の に つ い て beg す 検 る こ と を today back の purpose と し た. Isolate and refine the された molecular weight 29KDa <s:1> protein, partition the <s:1> n-terminal ア ノ ノ acid, coordinate the <s:1> 26,695 strain of <s:1> HP78 and びJ99 strain of <s:1> JHP73 伝 sub <s:1> n-terminal, coordinate と the same であった. 150 cases of clinical isolates か ら spare し た を DNA PCR を with い て beg し 検 た results, good product picture は long さ に よ り 2 group of more than 770 bp and 770 bp の に classification さ れ 5 cases 150 cases 76 cases と で あ っ た. Omp29 posthumous son 伝 の tectonic に つ い て short 770 bp group は mutual い い に ほ ぼ with じ match column で あ っ た の に し seaborne, long い サ イ ズ group は save さ れ た match column の に between 5 'end か ら 180 bp の position に, 762 bp to 1264 bp と 々 の long さ で save sex low の い match column が scions into さ れ た tectonic と な っ て い た. Scions into さ れ た different な る match column の 5 'and び 3' end に は 17 bp か ら into る same direction with column が each 々 confirmed さ れ た. ま た each legacy 伝 son の ORF construct は 770 bp group で は 単 one ORF で あ る の に し seaborne, long い サ イ ズ group で は several の ORF に breaking さ れ て い た. Protein group み in え Omp29 に す seaborne る ウ サ ギ antiserum を with い た immunoblot で は, 単 の ORF か ら る 770 bp group で は 29 kda に の position against 応 が see ら れ た が, long い サ イ ズ group で は ORF が breaking さ れ て い る た め に anti 応 は recognize め な か っ た. Party, Omp29 を 発 now protein antigen と し て の antibody in serum retain の presence of を confirm し た と こ ろ, whole て の に 29 patients with kda の 応 content を confirm で き た. Omp29 heritage 伝 child with column に は, two の 17 bp か ら into る Qiao り return し match column が し, こ の に between scions into さ れ た salt base with long column の さ の violations い で ゲ ノ ム all long の さ が variations change す る よ う な new rules の scions, into the peeling machine, sequence が exist す が る things to want to さ れ た. こ の よ う な メ カ ニ ズ ム に よ り H.p ylori ゲ ノ ム の - different か ら, antigenicity の variations, さ ら に は の host immune surveillance agency か ら の avoid に よ り に to hold 続 infection る こ と が to think さ れ た.

项目成果

Ikewaki J. et al.: "Therapeutic oral vaccination induces mucosal immune response sufficient to eliminate long-term Helicobacter pylori infection"Microbiol. Immunol. 44・1. 29-39 (2000)

Ikewaki J.等人：“治疗性口服疫苗诱导足以应对长期幽门螺杆菌感染的粘膜免疫反应”Microbiol. 29-39 (2000)。

Oda.T.et al.: "Long-term Helicobacter pylori infection in Japanese monkeys induces atrophic gastritis and accumulation of mutations in the p53 tumor suppressor gene"Helicobacter. (in press).

Oda.T.等人：“日本猴子长期幽门螺杆菌感染会诱发萎缩性胃炎和p53抑癌基因突变的积累”

Sumie A. et al.: "Comparison of Genomic Structures and Antigenic Reactivities of Orthologous 29-Kilodalton Outer Membrane Proteins of Helicobacter pylori"INFECTION AND IMMUNITY. 69・11. 6846-6852 (2001)

Sumie A.等人：“幽门螺杆菌直系同源29-Kilodalton外膜蛋白的基因组结构和抗原反应性的比较”感染和免疫69·11。