光駆動型塩化物イオンポンプ、ファラオニスハロロドプシンのプロトンポンプへの変換

光驱动氯离子泵，将法老盐视紫红质转化为质子泵

• 批准号: 13780520
• 负责人: 鷲見 正人
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780520/
• 关键词: レチナールタンパク質; 古細菌; 膜タンパク質; イオンポンプ

本研究の準備段階においてファラオニスハロロドプシン(pHR)T126D変異体には顕著な機能変化の兆候は見られなかったものの、T126Eにおいては野生型にはないがBRには見られるMと呼ばれる準安定状態を光反応中にとることが分かった。このM中間体は反応中心がプロトン化されていることを意味する。前年度の結果より、T126E変異体が、外界のプロトンをタンパク質内に取り込み、反応中にそれを放出するプロトン移動を行なうことを、高感度pHセンサーを用いて測定することに成功した。本年度は、このプロトンのやりとりが膜を隔てて行なわれているかを、T126E変異体を発現している大腸菌膜の反転膜ベシクルを作成し、光照射時の外界のpH変化を測定することで確認したが、残念ながら有意なpH変化を検出することはできなかった。接触媒体とのプロトンのやりとりをしているが、膜を隔てたpH勾配を検出できないことは、類似タンパク質のファラオニスセンサリーロドプシンII(pSRII)と同様に、BRで必要とされるプロトン輸送経路(具体的には水素結合ネットワーク)が形成されていないことが原因としてあげられる。こうした分子内環境を整える目的で多重変異体を作成、同様の測定を試みたがむしろ外界とのプロトン交換活性は低下してしまった。結論として、プロトン輸送とクロライド輸送の差異を明らかにするモデルとして期待されたpHR T126E変異体であったがsHR同様にプロトンポンプは成功しなかった。このことは、クロライドイオンポンブに必要とされる分子内機構は、プロトン輸送に係るそれに比べて単純でよいということを強く示唆するものである。

In this study, we are ready to use the pHR T126D computer to determine whether or not you are in a stable state. In this study, we are going to be able to improve the performance of the real-time health care system (pHR), T126D, T126D, and T126E. In M, the body reverses the center and changes the meaning of the body. In the previous year, the results showed that the T126E test system, the external system, the internal device, the operator, and the high-sensitivity pH sensor were used to determine the success of the test. This year, in the current year, the main purpose of this year is to determine the accuracy of the film, the T126E system, the anti-bacterial membrane, the external pH, the determination of the temperature, the confirmation and the intention of the pH. Contact with the media in different ways, the diaphragm, the pH match, the reason, the contact, the contact with the media, the The purpose of this study is to develop a multiplex system for the purpose of intra-molecular environmental protection, which can be used for the determination of environmental pollution in the external environment, low activity and low activity. Results We are looking forward to the success of pHR T126E. We are looking forward to the success of sHR. It is necessary to send a message to the intramolecular organization and send a message to the local government.