細胞質性ダイニンの微小管結合部位の研究

细胞质动力蛋白微管结合位点的研究

• 批准号: 13780524
• 负责人: 八木 俊樹
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780524/
• 关键词: 微小管; ダイニン; ATP; 鞭毛; クラミドモナス; コイルドコイル

ダイニンはモータードメインから突き出したストークと呼ばれる構造により微小管と結合する。ストークを形成するのは逆平行コイルドコイルからなる棒状構造とその先端にある微小管結合領域である。ATP加水分解に伴うダイニン頭部の構造変化は,何らかの方法により,ストーク先端にある微小管結合領域の構造変化に変換されるはずである。その変換機構においてダイニンストークが何らかの機能を果たしている可能性が高い。本研究では,ダイニンストークの性質を調べる実験を行った。まず,マウス細胞質性ダイニンのストークを大腸菌の組換えたんぱく質として発現精製し,微小管との結合実験を行った。その結果,コイルドコイルの長さによりストークと微小管との結合の強さが変化することがわかった。一方,クラミドモナス鞭毛ダイニンについても同様の研究を行った。クラミドモナスのSup^<pf>1突然変異株は鞭毛外腕ダイニンβ重鎖のストークを部分的に欠損している。中心対微小管(CP)やスポーク(RS)を欠失したクラミドモナスの変異株は非運動性であるが,これらの変異株とSup^<pf>1株との二重変異株は運動性を回復する。運動性回復の原因を調べるために,外腕ダイニンβ重鎖の野生型およびSup^<pf>1変異型のダイニンストークにおいて微小管との結合の強さを比較したところ,変異型ストークは野生型ストークよりも強く微小管に結合できることがわかった。CP/RSがない場合,野生型ダイニンは微小管との結合が弱くなってしまって鞭毛の運動性がなくなるが,変異型ダイニンでは微小管との相互作用が野生型のものよりも強くなって,CP/RSがなくても運動性をもつのではないかと考えられた。以上2つの結果から,コイルドコイルの領域には微小管結合領域と微小管の相互作用の強さを調節する機能があることが示唆された。

The structure of the micro-tube is composed of two parts: one part is composed of two parts, the other part is composed of two parts. A rod structure is formed in the reverse direction of the axis, and the tip of the rod structure is connected with the microtube. ATP hydrolysis accompanied by structural transformation of the head, how to change the method, the tip of the micro tube combined with the field of structural transformation The possibility of changing the mechanism is high. This study is based on the study of the nature of the disease. In addition, it is necessary to improve the quality of Escherichia coli and the combination of microtubes. As a result, the length of the connector and the strength of the combination of the connector and the micro tube have become stronger. On the other hand, it is necessary to conduct research on the same subject. A mutant is a mutant that is deficient in its flagellum<pf>. The center of the microtube (CP) is not the same as the center of the microtube (RS), but the center of the microtube (CP) is the same as the center of the microtube (RS)<pf>. The cause of mobility recovery is regulated by the wild-type, heterotypic and heterotypic characteristics of β-relocking<pf>. In the case of CP/RS, the wild type of CP/RS is weak in the combination of microtubules and flagellates, and the heteromorphic type of CP/RS is weak in the interaction of microtubules and wild type of CP/RS. As a result of the above 2, the micro-tube bonding field and the micro-tube interaction field are regulated.