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ジェミニウイルスの分類ならびに感染増殖に関する分子生物学的研究

双生病毒分类和感染生长的分子生物学研究

基本信息

批准号：
02F02211
负责人：
高浪洋一
金额：
$ 0.26万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02F02211/
关键词：
Geminivirus 病原性スイカズラ Begomovirus Honeysuckle yellow vein virus

项目摘要

ジェミニウイルスは熱帯,亜熱帯地方を中心に猛威をふるっているコナジラミ伝搬性のDNA植物ウイルスであって,近年日本の施設栽培トマト等においても被害が見られるようになってきた。一方,日本では以前からTobacco leaf curl virusに感染しているスイカズラ及びヒヨドリバナが存在している。そこで,日本各地から収集したジェミニウイルス罹病スイカズラを試料とし,それぞれの試料の相互関係を知るため,PCR法によりウイルスのゲノムDNAのクローニングを行うとともに,それぞれのクローンの塩基配列決定を行った。また,ウイルスの増殖には必須ではないが,病徴発現に影響を与えるサテライトDNAと呼ばれる分子であるDNAβのPCRによる増幅,クローニングと塩基配列決定も合わせて行った。研究実施の結果,各分離株について約2700bpの全長DNA-Aクローンを得,これらの全塩基配列を決定した。これらの塩基配列データを基にして各試料に含まれるウイルスの系統発生的相互関係を明らかにするとともに,長い歴史の間にウイルス相互間の組み換え現象があることを認めた。また,神戸および札幌の試料から完全長DNAβのクローンを得,その塩基配列を決定した。感染スイカズラには黄色病徴示す試料があり,この病徴発現とDNAβの存在が関連している可能性が考えられた。特記すべき成果として,本ウイルスの機械的接種の成功が挙げられる。すなわち,スイカズラ由来のウイルス株をタバコおよびN.benthamianaに塗沫接種を行ったところ,神戸株のN.benthamianaへの人工接種に成功し,接種植物にウイルスゲノムDNA AおよびDNAβが存在することをPCRによって確認した。これまで本ウイルスの人工接種の成功例はなく,高く評価される業績である。

In recent years, in Japan, the construction and cultivation of DNA plants have been carried out in Japan. In recent years, they have been killed in Japan. On the one hand, in Japan, there was a previous infection of Tobacco leaf curl virus infection in Japan, and there was an infection in Japan. All over Japan, all over the country, people are sick because they are sick. They know about each other. The PCR method is used to determine the behavior of each other. The PCR method does not tell you what to do, and the base column determines the row. It is necessary for the colonization of the disease to be affected. When the disease occurs, you can see that the disease is affected and the DNA is affected by the molecular DNA β PCR. The configuration column determines the combination of the data. The results of the study showed that the full-length DNA-An of each ramet was obtained, and the full-length DNA-An of each ramet was determined by column chromatography. The basic equipment of the system includes the mutual communication between the students of the system and the students of the system, and the history of the system is similar to that of the system. In Sapporo, the total growth of DNA β is very high, and the basic equipment is to determine the size of the system. The possibility of infection with yellow disease indicates that there is a risk of DNA β infection. Special thanks to the award of the results, and the successful adoption of the mechanical equipment in this factory. The reason for this is that the plants were inoculated with N.benthamiana foam, and the N.benthamiana strains were successfully inoculated artificially, and the plants were inoculated successfully into DNA An and DNA β plants. This is a good example of successful manual inoculation, and a high level of training is needed.