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担子菌の子実体形成に関わる酵素とその遺伝子の発現と制御

担子菌子实体形成相关酶及其基因的表达与调控

基本信息

批准号：
02F02515
负责人：
鮫島正浩
金额：
$ 0.45万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では,木材腐朽試験の指標菌である褐色腐朽菌オオウズラタケ(Fomitopsis palustris)をとりあげ,菌糸体の生育および子実体形成時に発現する酵素ならびに遺伝子を調べることで,子実体形成を支配する生化学ならびに分子生物学的な因子について解明していくことを目的として研究を行った。セルロース培養系で培養した本菌の菌体外液をカラムクロマトグラフィーによって精製し,様々なセルラーゼ活性を測定した。その結果,30kDaおよび35kDaのタンパク質は色素結合型ヒドロキシエチルセルロースを分解したことから,いずれもエンドグルカナーゼであると考えられた。しかしながら,70kDaのタンパク質は様々なセルラーゼ活性を測定したが,活性を検出することはできなかった。そこで,本酵素をV8プロテアーゼを用いて部分消化したのち,SDS-PAGEで分離して得られた断片のN末端アミノ酸配列を決定し,さらにこの配列について白色腐朽菌Phanerochaete chrysosporiumのゲノム情報に対してBLAST検索をかけたところ,糖加水分解酵素ファミリー15に属するグルコアミラーゼの部分配列と高い相同性を持つことが分かった。さらに,本酵素の基質特異性を調べた。その結果,本酵素はグルコアミラーゼであることを明らかにした。さらに,このグルコアミラーゼは菌体の子実体形成時に発現する酵素であることを確認した。また,代表的な食用きのこであるシイタケ(Lentinula edodes)の子実体形成に本酵素が重要な役割を果たしていることが遺伝子的に報告されている。したがって,本酵素は担子菌の子実体形成に関わる酵素として重要であり,その機能を生化学的ならびに分子生物学的に解明するため,対応する遺伝子のクローニングを試み,これに成功した。

In this study, the indicator of wood decay was identified by brown rot fungus, the brown rot fungus, the brown rot fungus (Fomitopsis palustris), and the progeny of the fungus, which produced enzymes and enzymes that dominated the molecular biology of biochemistry and biochemistry. the purpose of this study was to understand the purpose of this study. The bacteria were cultured in vitro, and the activity was determined by the determination of activity. The results show that 30 kDa, 35kDa, pigment, pigment and pigment. The activity was determined by the determination of the activity, the activity was measured, and the activity was detected. The activity was measured, and the activity was measured. The enzyme V8 was partially digested, and the SDS-PAGE was isolated. The fragments were separated, the N-terminal fragments, the acid column, the determination, the white rot fungus Phanerochaete chrysosporium, the white rot fungus, the white rot fung Sugar and water decomposing enzyme "15" belongs to "high homogeneity" and "high homogeneity" in part. This enzyme has a special effect on sex. The results showed that the enzyme was sensitive and sensitive. During the formation of the mycelium, the enzyme enzyme was confirmed by the enzyme enzyme assay. This enzyme is important to cut the fruits of this enzyme, which is the report of the fruit cuttings, which is important for the production of this enzyme. In this enzyme, the basidiomycetes form an important enzyme, the enzyme is important in biochemistry, the molecular biology of biochemistry, the understanding of molecular biology, the success of the experiment.