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歯牙形成における分化関連因子Pax6,Lef1遺伝子の発現解析と歯牙再生誘導の試み

牙齿形成中分化相关因子Pax6和Lef1基因的表达分析并尝试诱导牙齿再生

基本信息

批准号：
02J00978
负责人：
長田奈津紀
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

頭部神経堤細胞初代培養系の培養条件等を検討し最適化することに成功した。歯牙形成における最も重要な上皮間葉相互作用をin vitroでmimicすることで、形態形成に不可欠な遺伝子発現を解析することを目的としてこの系を用い、頭部神経堤細胞分化関連因子である、Pax, RUNX1,2,3, Id2遺伝子およびそれらの変異型(ドミナントネガティブ変異体、活性型変異体を含む)数種をレトロウイルスベクターにて強制発現させ、歯牙形成や顎顔面部の形成過程を確認したところ、RUNXをはじめとするいくつかの遺伝子によって著しく形成促進もしくは遅滞を認めた。また、これらのノックアウトマウス解析も並行して行ったところ、顔面形成の変異を認めるものが一部確認された。最終目標である、歯牙再生誘導を可能ならしめるためには、歯牙形成における分化制御機構における、これらの遺伝子の寄与を長期にわたって分析することが重要と考えられる。具体的には、同じ頭部神経堤細胞塊から、上皮系細胞群と間葉系細胞群を分離し、各々を適当なscaffold内で培養したのち、同系マウス腎皮膜下へ移植して、細胞塊間の相互作用評価と、その結果としての歯牙硬組織形成を試みたが、こちらは満足な結果に至っていない。しかしながら、その上で数種の遺伝子の強制発現、もしくは、dominant negative変異体による機能阻害による効果についてはいくつかの知見が得られた。

The optimization of culture conditions of primary culture line of brain cells was carried out successfully. Epithelial-mesenchymal interactions are the most important factors in tooth formation. They are in vitro mimic interaction, morphogenetic interaction, and morphological differentiation. They are related to cell differentiation. Pax, RUNX1,2,3, Id2, and heteromorphism. The process of stress development, tooth formation and jaw formation was confirmed in several types of RUNX. It's a part of recognition. The ultimate goal is to investigate the role of differentiation control mechanisms in tooth formation, tooth regeneration induction and long-term analysis. Specific cell blocks of the same head, epithelial and mesenchymal cell populations were isolated, cultured in appropriate scaffolds, isogeneic subrenal epithelial transplantation, evaluation of interactions between cell blocks, and results of dental hard tissue formation. There are several kinds of genetic stress, such as stress, dominant negative, heterogenous, functional resistance, effect, knowledge, etc.