キメラブロモウイルスの適応多様性を利用した移行タンパク質遺伝子の機能解析

利用嵌合溴病毒的适应性多样性进行过渡蛋白基因的功能分析

• 批准号: 02J01052
• 负责人: 佐々木 信光
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J01052/
• 关键词: ブロムモザイクウイルス; ササゲクロロティックモトルウイルス; 長距離移行; 外被タンパク質要求性; 移行タンパク質遺伝子; 緑色蛍光タンパク質; 分子進化; 分子生物学

ブロムモザイクウイルス(BMV)の3aタンパク質を発現する遺伝子組換えササゲクロロティックモトルウイルス(CCMV)はササゲを全身感染宿主としない。一方で組換えCCMVを接種したササゲでは、全身感染能を獲得した突然変異体の出現が観察されていた。これらの突然変異体を解析することにより、3a遺伝子の特定の5カ所のコドンのいずれかに塩基置換が起こっていること、それにともなうLysかArgへのアミノ酸変異(適応変異)が突然変異体の出現に関与していることを明らかにした。また、組換えCCMVはBMV同じく細胞間移行に3aタンパク質だけでなく外被タンパク質も必要とするという特徴をもつ。この外被タンパク質要求性が適応変異によりどのように変化しているのかについて、外被タンパク質遺伝子を緑色蛍光タンパク質遺伝子に置換した変異体ウイルスを用いることにより調べた。その結果、適応変異を起こした組換えCCMV変異体は外被タンパク質非依存的に移行できることが分かった。同様に適応変異を起こしたBMV変異体も外被タンパク質に依存せずに細胞間移行できることが分かった。このことから適応変異により3aタンパクと外被タンパク質との相互作用が変化していること、そして変異の位置しているタンパク質の中央領域がその相互作用に関与する領域であることが示唆された。一方で、自然発生的な適応変異はアミノ酸特異的であることを示唆されていた。そこで、適応変異の見られた5カ所のコドンに人工的に塩基置換を導入し、LysあるいはArgのアミノ酸変異がササゲへの全身感染にどのように影響するかを調べた。その結果、LysあるいはArg以外のいくつかのアミノ酸への変異によっても組換えCCMVがササゲに全身感染できるようになることが分かった。この結果により、適応変異の出現に対して塩基置換あるいはタンパク質レベルで自然選択圧が働いていることが示唆された。

A subset of BMV's 3a protein is present in the host. CCMV's 3a protein is present in the host. A group of CCMV vaccinations can be used to detect the sudden emergence of systemic infections. The sudden change in the analysis of the variant is related to the sudden change in the expression of the variant. CCMV has the characteristics of cell-to-cell migration in BMV. The outer coating quality requirements are different from each other. The outer coating quality requirements are different from each other. The outer coating quality requirements are different from each other. The result is that the CCMV is different from the original one. The same is true for the BMV, but the same is true for the BMV, and the same is true for the BMV. The interaction between the two substances is different from each other. A party, naturally born, different from each other, acid specific, such as water, water, etc. The effect of artificial base substitution on systemic infection is regulated by the introduction of Lys and Arg. As a result, the change in the acidity of Lys Arg and Iku. The result is that there is a difference between the two groups.