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植物ウイルス移行タンパク質と相互用作する植物KELPタンパク質の機能解析

与植物病毒转移蛋白相互作用的植物KELP蛋白的功能分析

基本信息

批准号：
18880010
负责人：
佐々木信光
金额：
$ 1.7万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

1.目的遺伝子をニコチアナ・ベンサミアーナの表皮細胞で一過的に過剰発現させる実験系を用いて、KELPのウイルス感染抑制機構を検証した。その際、蛍光タンパク質を標識として用い、ウイルス感染やタンパク質発現の可視化を行った。その結果、KELPの一過的過剰発現により、KELPと相互作用するMPの細胞内局在が変化することを明らかにした。また、KELPのウイルス感染抑制・MPの機能阻害効果は、当該タンパク質のN端半分の領域があれば十分であることを明らかにした。2.ウイルス感染におけるKELPの本来の機能や遺伝子発現を検証した。シロイヌナズナにToWVが感染することによってKELP遺伝子の発現量はほとんど変動しないことがわかった。また、KELP遺伝子を欠損したシロイヌナズナ変異体を入手し、2種のホモ系統を選抜した。それら2種のホモ系統に関して、感染初期におけるウイルス感染の感受性が若干高まっていることを示唆するデータを得た。3.bimolecular fluorescence complementation法用のプラスミドを構築し、KELPとMPとの生体内における相互作用を検証した。その結果、両タンパク質が生体内で直接的に相互作用していることを示唆するデータを得た。4.KELPのホモログをトマトとタバコから単離し、一過的な遺伝子発現実験用プラスミドに導入した。5.KELPを過剰発現するシロイヌナズナの作出を試みた。以上、当該年度に行った研究の結果、KELPがMPと生体内で直接的に相互作用し、ウイルス感染に対して阻害的に働く因子である可能性を示すことができた。また、KELPの抑制作用機構の解明に向けて、さらに研究を進めていくための実験基盤を作ることができた。

1.Purpose: をニコチアナ・ベンサミアーナのepidermal cells The infection suppression mechanism of the KELP infection control system is certified.その记, 荍光タンパク性をLOGO, として用い, ウイルス infection, やタンパク性発appears を行った.そのRESULTS, KELPの无码牰発appearsにより, KELPとinteractionするMPの成 in the cell が変化することを明らかにした.また、KELPのウイルスInfection suppression・MPのfunctional blocking effectは、When the タンパクqualityのN-terminal half-point field is very clear and clear. 2. ウイルス infection におけるKELP の originally the function や伝子発を検证した.シロイヌナズナにToWVがinfectionすることによってKEL P 伝子の発成quantity はほとんど変动しないことがわかった.また, KELP 缝子を无码したシロイヌナズナ変variant をGet started, 2 kinds of のホモsystem をselect した.それら2 kinds of のホモsystem に关して、Initial stage of infection におけるウイルスSense The susceptibility to dyeing is somewhat high and the dyeing sensitivity is high. 3. The bimolecular fluorescence complementation method is constructed using bimolecular fluorescence, and the KELP and MP are used to interact with each other in vivo.そのRESULTS, 両タンパクquality が生でDIRECTIONAL に INTERACTION していることをshows instigation するデータをget た. 4.KELPのホモログをトマトとタバコから単し, once passed by な伝子発 appear 実験用プラスミドに imported した. 5.KELPをpassing 剰発appears するシロイヌナズナのmaking をtrial みた. The above is a direct interaction between the results of the year's research and the KELP MP in vivo. The possibility of blocking the に働く factor である with し, ウイルス infection に対して is shown by すことができた. KELP's inhibitory mechanism is explained by the research and development of the inhibitory mechanism of KELP.