細胞膜および核におけるイノシトールリン脂質情報伝達系による細胞機能制御機構

细胞膜和细胞核中肌醇磷脂信号转导系统的细胞功能控制机制

• 批准号: 02J02245
• 负责人: 山鹿 真幸
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Himeji Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J02245/
• 关键词: イノシトールリン脂質; ホスホリパーゼCδ1; RhoGAP; ラフト; ホスホリパーゼC; アクチン細胞骨格; マイクロドメイン; カベオラ; カベオリン; Rho

本研究では細胞内におけるホスファチジルイノシトール(PI)情報伝達系において重要な役割を果たしているホスホリパーゼC(PLC)δ_1の細胞内における活性制御機構および生理機能を明らかにするためにPLCδ_1結合タンパク質の性状解析をおこなった。PLCδ_1と相互作用するタンパク質としてクローニングされたp122は、これまでに低分子量GTP結合タンパク質Rhoに特異的なGTPase activating Protein(GAP)であること、PLCδ_1の酵素活性を亢進させることなどが明らかになってている。本研究ではまずp122が細胞内情報伝達のプラットホームとして機能している膜領域のラフトに存在することを明らかにした。ラフトを介した細胞機能の調節の一つに細胞内Ca^<2+>濃度の調節がある。神経細胞様細胞株PC12細胞をカルバコールで刺激すると細胞内Ca^<2+>濃度が上昇する。この時、p122を免疫沈降したところ刺激前と比べ共沈してくるPLCδ_1が増加した。また、ショ糖密度勾配遠心分離による解析から、カルバコールによる刺激でPLCδ_1が低密度画分に移行すること、この移行はイオノマイシン処理でも、また、細胞外Ca^<2+>を除去した条件下でも観察されたことからPC12細胞においてPLCδ_1はカルバコール刺激による細胞内Ca^<2+>貯蔵部位からのCa^<2+>放出によりラフトに移行し、p122と結合し、活性化されると考えられる。これらの結果からPLCδ_1はラフトで活性化されラフトを介した細胞内Ca^<2+>濃度の調節に関与していることが示唆された。

In this study, the intracellular control mechanism and physiological function of C(PLC)δ_1 in the intracellular control system of PI (PI) information transmission system were analyzed. PLCδ_1 interacts with low molecular weight GTP-binding protein Rho, which is specific for GTase activating Protein(GAP). In this study, we found that p122 has a function of intracellular information transmission and the existence of membrane domain. The regulation of intracellular Ca^<2+> concentration is one of the key factors in the regulation of cell function. Neurocytes and cell line PC12 cells were stimulated by a large amount of calcium and intracellular calcium concentration increased. P122 protein expression increased before stimulation. For example, if the concentration of glucose is matched with the concentration of glucose, the concentration of glucose is matched with the concentration of glucose, and the concentration of glucose is matched with the concentration of glucose. Under the condition of extracellular Ca <2+> removal, the intracellular Ca <2+> storage site of PC12 cells was stimulated by PLCδ_1, and Ca <2 +> release, migration, p122 binding and activation were observed. The results showed that PLCδ_1 was activated and regulated by intracellular Ca^<2+> concentration.

项目成果

Masaki Yamaga: "p122/RhoGAP, A PLCd1-IMTERACTING PROTEIN, IS LOCALIZED IN LIPID RAFTS"Cell Structure and Function. 27. 255 (2002)

Masaki Yamaga：“p122/RhoGAP，一种 PLCd1 相互作用蛋白，定位于脂质筏中”细胞结构和功能。

Masaki Yamaga: "APLCδ_1-binding protein, p122/RhoGAP, is localized in caveolin-enriched membrane domains and regulates caveolin internalization"Genes to Cells. 9・(1). 25-37 (2004)

Masaki Yamaga：“APLCδ_1 结合蛋白，p122/RhoGAP，位于富含小凹蛋白的膜结构域并调节小凹蛋白内化”9·(1) 25-37 (2004)。

Masaki Yamaga: "p122/RhoGAP, a PLCδ_1-interacting protein, is localized in lipid rafts."Cell Structure and Function. 27. 255 (2002)

Masaki Yamaga：“p122/RhoGAP 是一种 PLCδ_1 相互作用蛋白，位于脂筏中。”《细胞结构与功能》，27. 255 (2002)。

Hitoshi Yagisawa: "Regulation of the intracellular localization of phosphoinsitide-specific phospholipase Cδ_1"Advances in Enzyme Regulation. 42. 261-284 (2002)

Hitoshi Yagisawa：“磷酸肌醇特异性磷脂酶 Cδ_1 的细胞内定位的调节”酶调节进展 42. 261-284 (2002)。