桿体・錐体それぞれに特異的に発現する遺伝子の同定

鉴定在视杆细胞和视锥细胞中特异性表达的基因

• 批准号: 02J04503
• 负责人: 松川 淑恵 (嶋内 淑恵)
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J04503/
• 关键词: 視細胞; 桿体; 錐体; 遺伝子; 脊椎動物

脊椎動物の網膜に存在する視細胞は、桿体型と錐体型の2種類に大別されている。これらは、形態的に異なるばかりでなく、桿体は暗所視、錐体は明所視と役割も異なる。両者の違いについては、光情報伝達系や、視覚回路など分子レベルで詳しく調べられつつある。当研究室では、桿体・錐体を分けて採取する方法を確立しているので、それぞれの視細胞で発現する遺伝子の解析を試みた。まず、RNAを抽出する試料の収集法を検討した。これまでに桿体画分からはRNA抽出に成功していたが、同様の方法によって得た錐体画分由来RNAには、ミトコンドリアマーカーは含まれるが、錐体マーカー量はわずかであった。そこで収集法を改良した結果、錐体マーカーを充分量含む試料を得ることができた。先の試料を用い、SSH法によるサブトラクションを行った。ランダムに抽出した576 cloneのうち、マクロアレイによって、343 cloneをrod rich、88 cloneをcone rich遺伝子の候補とした。それぞれのcDNAクローンの塩基配列を決定したところ、rod rich遺伝子候補の中には、桿体型cGMP gated channel alpha、 トランスデューシン、ロドプシンなど桿体に特異的に発現することが知られている遺伝子が含まれていた。一方、cone rich遺伝子候補の中には、これまで錐体で特異的に発現することが知られている遺伝子と相同な配列は見られなかった。これらの候補遺伝子が実際に桿体または錐体特異的に発現してることを検証するために、in situ hybridization法1こよって発現部位を調べた。桿体特異的に発現する遺伝子候補配列のうち8配列について調べたところ、桿体特異的に発現するものは見いだせなかった。錐体特異的に発現する遺伝子の候補については、4配列について調べたところ、aryl hydrocarbon receptor 2とAcyl-CoA-binding protein 4がコイ網膜において錐体に多く発現し、N-myc downstream regulated gene 1が錐体特異的に発現していることを確認した。今後、これらの遺伝子の役割について解析されることにより、桿体・錐体の違いを産み出す分子基盤を明らかになるものと期待される。

There are two types of visual cells in vertebrate retina: rod type and pyramid type.これらは、形态的に异なるばかりでなく、杆体は暗所视、锥体は明所视と役割も异なる。The light information transmission system, the visual loop, the molecular transmission system, the visual loop, the molecular transmission system, the visual loop, the visual loop. When the research laboratory adopts the method of rod and cone separation, it is necessary to establish the method of molecular analysis for the detection of the protein in the visual cells. Sample collection method for RNA extraction The method for extracting RNA from the stem cells is similar to that for extracting RNA from the stem cells. The method of collecting samples is improved, and the cone is filled with samples. Prior to the test, SSH method was used. 576 clone, 343 clone, rod rich, 88 clone, cone rich, etc. The gene base alignment of all cDNA fragments is determined by the gene expression of the cDNA fragment, the gene expression of the cDNA fragment is determined by the gene expression of the cDNA fragment, the gene expression of the cDNA fragment is determined by the gene expression of the cDNA fragment. A square, cone rich seed candidate in the middle of the cone, the cone is specific to the occurrence of the seed, the same seed is matched to the occurrence of the seed. The candidate gene is selected from the group consisting of the cone specific gene, the gene, and the gene. The rod-specific occurrence of the candidate sequence is determined by the sequence of sequences. Cone-specific gene expression candidate, 4-sequence gene expression candidate, aryl hydrocarbon receptor 2 and Acyl-CoA-binding protein 4 cone-specific gene expression candidate, N-myc downstream regulated gene 1 cone-specific gene expression candidate, 4-sequence gene expression candidate, aryl hydrocarbon receptor 2 and Acyl-CoA-binding protein 4 cone-specific gene expression candidate. In the future, the molecular structure of the rod and cone will be analyzed in detail.