脱分化と分裂組織形成に関わる遺伝子SRD2の解析

SRD2（一种参与去分化和分生组织形成的基因）的分析

• 批准号: 02J08536
• 负责人: 大谷 美沙都
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J08536/
• 关键词: 分化全能性; 脱分化; 分裂組織形成; SRD2; snRNA; 増殖能

SRD2によるsnRNA転写活性化機構に関して、U2 snRNAプロモーターに存在するシス因子、USE内に変異を導入した変異型プロモーター::レポーター遺伝子(LUC)を作製し、野生型、srd2変異体のカルスでの一過的発現解析を行った。その結果、USE内に変異が入るとレポーター活性が著しく低下し、野生型プロモーター::LUCで見られるsrd2変異による温度感受性も無くなった。これはSRD2がUSEに直接的に作用して機能していることを示唆している。根断片から側根を誘導し、側根分裂組織形成におけるsnRNA蓄積量の変化とそれに対するsrd2変異の影響を、抗TMG抗体(snRNAのトリメチルグアノシンキャップ構造に対する抗体)を使った免疫組織学法で調べた。野生型では側根原基の形成に伴ってsnRNA量が増大し、一旦その蓄積量が減少した後、再び原基の付け根付近からsnRNA量が増加して、最終的には根端分裂組織での強いシグナルが検出されるというパターンを示した。これに対して、制限温度下で形成されるsrd2の(正常な分裂組織を欠いた)異常瘤状側根では、snRNA量の2回目の増大が見られなかった。以上は、SRD2によるsnRNA転写活性化が側根の分裂組織形成において重要な役割を担っていることを意味している。また、RD2遺伝子座にT-DNAが挿入された形質転換体2ラインについて解析を行った。いずれのラインにおいても、T-DNA挿入に関するホモ個体は存在せず、SRD2遺伝子機能がシロイヌナズナの生育に必須であることが確かめられた。野生型との交配実験の結果、SRD2遺伝子座へのT-DNA挿入は配偶体致死と思しき分離比を示し、特に雌性配偶体への影響が大きいことが分かった。このことから、SRD2機能は配偶体形成に必須であると考えられる。

SRD2 snRNA transcription activation mechanism, U2 snRNA transcription factor, USE variant introduced into the host, wild type, srd2 variant gene (LUC) production analysis. As a result, the temperature sensitivity of LUC is not affected by the change in temperature. SRD2 is a direct function of USE. Changes in the amount of snRNA accumulated during the induction of root fragments and the formation of lateral root mitotic tissues are related to the effects of srd2 and anti-TMG antibodies. In wild type, the amount of snRNA associated with the formation of lateral root primordia increased, and once the accumulation of snRNA decreased, the amount of snRNA associated with the formation of lateral root primordia increased, and finally, the amount of snRNA associated with the formation of lateral root primordia increased. Under these conditions, srd2 (normal division tissue) was formed, and the amount of snRNA increased. SRD2 is an important part of the activity of snRNA in the formation of lateral roots. T-DNA analysis of RD2 gene loci was carried out. There is no doubt that the existence of SRD2 gene is related to the existence of T-DNA, and the function of SRD2 gene is necessary for the fertility of the organism. Wild type mating results, SRD2 gene locus T-DNA insertion into mating partner lethality, segregation ratio, and special female mating effects SRD2 function is necessary for mate formation.