C型肝炎ウイルスCoreタンパク質による細胞性遺伝子発現制御機構の解析

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本研究において、C型肝炎ウイルスCoreタンパク質(Core)による細胞性遺伝子発現制御機構を明らかにする研究を行った。今回、特にCoreによるレチノイン酸受容体(RAR)の転写活性化の分子機構についての研究を行った。まず、Coreのアミノ末端領域をベイトとして、この領域に結合する細胞性因子を酵母ツーハイブリッド法によりスクリーニングした。その結果、結合候補分子としてSp110bを同定した。Sp110bの分子機能はこれまで全く明らかになっていないので、まずSp110bの分子機能の解析を行った。Sp110bを細胞内に過剰発現させるとRARα活性が減少すること、および細胞内の内在性Sp110bをノックダウンすることによりRARα活性が上昇することより、Sp110bはRARα活性に抑制的に働くことが示唆された。またRARαのリガンド存在下でSp110bとRARαが相互作用すること、Sp110bがRARα結合配列をもつプロモーターに会合することより、Sp110bはRARαの転写コファクターであることが明らかとなった。また、培養細胞において内在性および外来的に発現させたSp110bは主に核に局在することが観察された。しかしながらCoreを発現させることにより、Sp110bは主に細胞質へと局在が変化すること、この局在の変化はCoreとSp110bとの相互作用を介していることが示唆された。このCoreによるSp110bの局在変化を阻害した時、CoreによるRARα活性化能は減弱することがレポーターアッセイ法により示されたことより、CoreはSp110bの局在変化を介してRARα転写活性化を引き起こすことが明らかとなった。