C型肝炎ウイルスCoreタンパク質による細胞性遺伝子発現制御機構の解析

丙型肝炎病毒核心蛋白细胞基因表达调控机制分析

基本信息

  • 批准号:
    02J61434
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 2003
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究において、C型肝炎ウイルスCoreタンパク質(Core)による細胞性遺伝子発現制御機構を明らかにする研究を行った。今回、特にCoreによるレチノイン酸受容体(RAR)の転写活性化の分子機構についての研究を行った。まず、Coreのアミノ末端領域をベイトとして、この領域に結合する細胞性因子を酵母ツーハイブリッド法によりスクリーニングした。その結果、結合候補分子としてSp110bを同定した。Sp110bの分子機能はこれまで全く明らかになっていないので、まずSp110bの分子機能の解析を行った。Sp110bを細胞内に過剰発現させるとRARα活性が減少すること、および細胞内の内在性Sp110bをノックダウンすることによりRARα活性が上昇することより、Sp110bはRARα活性に抑制的に働くことが示唆された。またRARαのリガンド存在下でSp110bとRARαが相互作用すること、Sp110bがRARα結合配列をもつプロモーターに会合することより、Sp110bはRARαの転写コファクターであることが明らかとなった。また、培養細胞において内在性および外来的に発現させたSp110bは主に核に局在することが観察された。しかしながらCoreを発現させることにより、Sp110bは主に細胞質へと局在が変化すること、この局在の変化はCoreとSp110bとの相互作用を介していることが示唆された。このCoreによるSp110bの局在変化を阻害した時、CoreによるRARα活性化能は減弱することがレポーターアッセイ法により示されたことより、CoreはSp110bの局在変化を介してRARα転写活性化を引き起こすことが明らかとなった。
This study に お い て, hepatitis C ウ イ ル ス Core タ ン パ ク mass (Core) に よ る cellularity heritage 伝 son 発 system now royal institution を Ming ら か に す る を line っ た. This time, the にCoreによるレチノ <s:1> <s:1> acid acceptor (RAR) <s:1> 転 is dedicated to the research of activated <s:1> molecular structures に った て て て を. ま ず, Core の ア ミ ノ end field を ベ イ ト と し て, こ の fields に す る yeast cell sex factor を ツ ー ハ イ ブ リ ッ ド method に よ り ス ク リ ー ニ ン グ し た. The そ そ result, combined with the candidate と てSp110bを, is determined to be <s:1> た. Sp110b の molecular function は こ れ ま で く Ming all ら か に な っ て い な い の で, ま ず Sp110b の molecular function の を line っ た. Sp110b に を cell through turning 発 now さ せ る と RAR alpha activity が reduces す る こ と, お よ び intracellular の internality Sp110b を ノ ッ ク ダ ウ ン す る こ と に よ り RAR alpha activity が rise す る こ と よ り, Sp110b は RAR alpha inhibition of に に 働 く こ と が in stopping さ れ た. ま た RAR alpha の リ ガ ン ド presence で Sp110b と RAR alpha が interaction す る こ と, Sp110b が RAR alpha combined with column を も つ プ ロ モ ー タ ー meet に す る こ と よ り, Sp110b は RAR alpha の planning write コ フ ァ ク タ ー で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, culture cell に お い て internality お よ び outside に 発 now さ せ た Sp110b は に nuclear に innings in す る こ と が 観 examine さ れ た. し か し な が ら Core を 発 now さ せ る こ と に よ り, Sp110b は main に cytoplasm へ と bureau in が variations change す る こ と, こ の bureau in の variations change は Core と Sp110b と の を interface interaction between し て い る こ と が in stopping さ れ た. こ の Core に よ る Sp110b の bureau in を - resistance against し た, Core に よ る RAR alpha activation can be weakened は す る こ と が レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ method に よ り shown さ れ た こ と よ り, Core は Sp110b の bureau in を interface - し て RAR alpha planning write activeness を lead き up こ す こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Koichi Watashi et al.: "Cyclosporin A Suppresses Replication of Hepatitis C Virus Genome in cultured Hepatocytes"Hepatology. 38・5. 1282-1288 (2003)
Koichi Watashi 等:“环孢素 A 抑制培养肝细胞中丙型肝炎病毒基因组的复制”《肝病学》38・5(2003 年)。
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