A diagnosis of the death by drowning using a molecular biological approach

使用分子生物学方法诊断溺水死亡

• 批准号: 13670428
• 负责人: KAKIZAKI Eiji
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13670428/
• 关键词: Legal Medicine; Diagnosis of drowning; Aquatic bacteria; Marine bacteria; PCR; PCR法; 溺死

The diatom identification in lungs and in other organs, as well as in the bone marrow, remains at the present time quite conclusive for the diagnosis of drowning. However, the method has several problems such as destruction and/or loss of diatoms, and an appearance of inorganic crystals which disturbs microscopic observation. To solve these problem, in this study we attempted to establish a new easy method, PCR analysis of the 16S ribosomal DNA (rDNA), to diagnose drowning using marine bacteria. We designed the specific primers regions in 16S rDNA of the marine bacteria (Listonella anguillarum). The 100 fg of template DNA from Listonella anguillarum was amplified by the primers. PCR products from the various bacteria (Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Serratia marcesceus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Proteus vulgaris, Streptococcus pyogens, Hemophilus influenza) were not detected. When the sea-water was mixed with human blood, the specific PCR products were detected from the blood sample. These results suggested that molecular biological detection of the marine bacteria is useful to diagnose drowning.

在肺和其他器官以及骨髓中的硅藻鉴定，目前仍然是溺水诊断的决定性因素。然而，该方法具有若干问题，例如硅藻的破坏和/或损失，以及干扰显微镜观察的无机晶体的出现。为了解决这些问题，本研究尝试建立一种新的简便的方法，16 S核糖体DNA（rDNA）的PCR分析，用海洋细菌诊断溺水。在海洋细菌（Listonella anguillarum）16 S rDNA中设计了特异性引物。用该引物对鳗利斯特氏菌100 fg的模板DNA进行了扩增。未检出各种细菌（大肠埃希菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、化脓性链球菌、流感嗜血杆菌）的PCR产物。当海水与人血混合时，从血液样品中检测到特异性PCR产物。这些结果表明，海洋细菌的分子生物学检测有助于溺水的诊断。

项目成果

Eiji Kakizaki et al.: "Molecular biological approach to the aquatic bacteria in drowning victim."Jpn. J. Legal Med.. 55. 419 (2001)

Eiji Kakizaki 等人：“溺水者体内水生细菌的分子生物学方法。”Jpn。

Eiji Kakizaki et al.: "Basic approach on the detection of aquatic bacteria for determination of drowning"Jpn. J. Legal Med.. 56. 103 (2002)

Eiji Kakizaki 等：“用于判定溺水的水生细菌检测的基本方法”Jpn。

柿崎 英二 他4名: "溺水中に存在する水棲細菌の分子生物学的検討について"日本法医学雑誌. 55. 419 (2001)

Eiji Kakizaki 等 4 人：“溺水时水生细菌的分子生物学研究”《日本法医学杂志》55. 419 (2001)。

柿崎 英二 他4名: "溺水中に存在する水棲細菌の分子生物学的検討について-基礎的検討-"日本法医学雑誌. 56. 103 (2002)

Eiji Kakizaki 等 4 人：“溺水时存在的水生细菌的分子生物学研究 - 基础研究”日本法医学杂志 56. 103 (2002)。

柿崎英二, 瀬尾泰久, 松田洋和, 小澤周二, 高濱桂一: "溺水中に存在する水棲細菌の分子生物学的検討について"日本法医学雑誌. 55・3. 419 (2001)

Eiji Kakizaki、Yasuhisa Seo、Hirokazu Matsuda、Shuji Ozawa、Keiichi Takahama：“溺水中存在的水生细菌的分子生物学研究”日本法医学杂志 55・3（2001 年）。