Alanyl-Peptidnucleinsäure/DNA-Chimäre zum Nachweis von DNA
用于检测DNA的丙氨酰肽核酸/DNA嵌合体
基本信息
- 批准号:5321196
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:2001
- 资助国家:德国
- 起止时间:2000-12-31 至 2004-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
DNA-Oligomere bestehend aus 23 Nucleotideinheiten, einem kovalent mit dem 5´-Ende verknüpften Fluorphor und einem mit dem 3´-Terminus verbundenen Quenchermolekül werden für die Diagnostik von DNA-Einzelsträngen verwendet. Sogenannte "molecular beacons" bilden in Abwesenheit der zu diagnostizierenden DNA einen Doppelstrang mit den sechs terminalen Nucleotiden (Stammregion). Durch Binden von DNA werden die Enden räumlich weit getrennt und Fluoreszenz lässt sich beobachten. Ziel dieses Vorhabens ist es, dieses Konzept zu verbessern, indem die Stammregion durch einen Alanyl-Peptidnucleinsäure-Doppelstrang ersetzt wird. Das sollte die Vorteile haben, dass der Fluorophor im Basenstapel integriert werden kann und damit dem Solvens nicht ausgesetzt ist, Nucleobasen im Gegenstrang als Quencher fungieren können, die Termini frei sind z.B. für die Verknüpfung mit der Festphase und schließlich DNA und Alanyl-PNA orthogonale Paarungssysteme darstellen. Die Verwirklichung dieser hybridisierten "molecular beacons" erfordert entweder einen stufenweisen Aufbau des Oligomers unter DNA-Synthsebedingungen oder eine Blocksynthese, bei der an beiden Enden des DNA-Oligomers Alanyl-PNA Oligomere ligiert werden. Beide Synthesemethoden sind Ziel dieses Vorhabens, wobei das Ligationskonzept auch für Peptid/DNA/Peptid-Ligationen Bedeutung haben sollte.
DNA寡聚体由23个核苷酸组成,一个5 ′-末端荧光标记的共价物和一个3 ′-末端荧光标记的淬灭剂韦尔登可用于DNA特异性序列的诊断。因此,在诊断DNA的过程中,“分子信标”会产生一个带有末端核苷酸(Stammregion)的双链体。DNA韦尔登的DNA结合使末端变得清晰,并使末端的DNA结合变得清晰。这些前体是这样的,这些前体是通过一种丙氨酰-肽核-双链体产生的。由于荧光体在底座上的完整性,所以不能用溶剂,也不能用韦尔登,在冷却剂中的核子基,末端是自由的。für die Verknüpfung mit der Festphase und schließlich DNA und Alanyl-PNA orthogonale Paarungssysteme darstellen.杂交“分子信标”的验证是通过DNA合成或嵌段合成寡聚体,然后在DNA-寡聚体Alanyl-PNA寡聚体的末端进行韦尔登。尽管合成方法是多种多样的,但肽/DNA/肽连接也是必需的。
项目成果
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Professor Dr. Ulf Diederichsen (†)其他文献
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