コンビケムによる合成ペプチド固相試薬の開発

Combichem开发合成肽固相试剂

• 批准号: 13750750
• 负责人: 中村 成夫
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: University of Miyazaki (2002)Kyushu University (2001)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13750750/
• 关键词: コンビケム; 合成ペプチド; 固相試薬; 分子認識; 比色試薬; 固相担体樹脂

本研究の目的は、ゲスト分子との錯形成を情報変換することにより分子センサとしての機能を持たせた合成ペプチドを、コンビケム手法により開発することである。ペプチドを樹脂上で合成し、そのままターゲット分子との相互作用に用いることができるかどうかを検討した。前年度に合成した樹脂担持型ペプチドは350nm以下の光を吸収し、発色基のスペクトルを妨害していると思われた。これを避けるには、p-ニトロフェノールよりも長波長側に吸収極大を持つアゾ色素を情報変換部位として樹脂担持型ペプチドに導入し、フローセルにより吸収スペクトルを測定した。しかし、スペクトル測定結果を見ると、500nm以下の光を吸収してしまい、吸収極大は見られなかった。アミンの添加に伴うスペクトル変化についても、スペクトルは変化したものの、吸収極大は見られなかった。一方、蛍光強度変化により、ホストーゲスト間の相互作用を検出できれば、より、高選択性、高感度の検出が期待できる。また、樹脂に光を透過させる吸光度測定に対し、樹脂が光を発する蛍光測定では、前述のような吸光度測定の際の問題を考慮せずに測定ができるので、より高速なライブラリの構築、及びスクリーニングが可能になる。そこで、樹脂担持型ペプチドに導入する蛍光色素の検討を行った。樹脂担持型ペプチドに導入する蛍光色素として、FITC(florescein-5-isotiocyanate)を選択した。FITCは、カルボン酸のプロトン解離によって蛍光強度が増加する蛍光物質である。また、ペプチドN末端への導入が容易に行える蛍光ラベル化剤である。FITCを樹脂担持型ペプチド(Leu-Leu-Leu)に導入し、マイクロブレートリーダーを用いて蛍光強度測定を行った。アミン濃度増加に伴い蛍光強度の増加が見られたものの、コントロール樹脂と蛍光増加に大きな違いは見られなかった。

は の purpose, this study ゲ ス ト molecular と の fault formed を intelligence - in す る こ と に よ り molecular セ ン サ と し て の function を hold た せ た synthetic ペ プ チ ド を, コ ン ビ ケ ム gimmick に よ り open 発 す る こ と で あ る. ペ プ チ ド を で on resin synthesis し, そ の ま ま タ ー ゲ ッ ト molecular と の に interaction with い る こ と が で き る か ど う か を beg し 検 た. Before annual に synthetic し た type resin bear hold ペ プ チ ド は の under 350 nm light を 収 し, 発 basement の ス ペ ク ト ル を sabotage し て い る と think わ れ た. Avoid こ れ を け る に は, p - ニ ト ロ フ ェ ノ ー ル よ り も long wavelength side suction 収 に を hold great つ ア ゾ pigment を intelligence - in part と し て type resin bear hold ペ プ チ ド に import し, フ ロ ー セ ル に よ り suction 収 ス ペ ク ト ル を determination し た. し か し, ス ペ ク ト ル determination results を see る と, below 500 nm の light を 収 し て し ま い, suck 収 は see great ら れ な か っ た. ア ミ ン の add に with う ス ペ ク ト ル variations change に つ い て も, ス ペ ク ト ル は variations change し た も の の, suck 収 は see great ら れ な か っ た. One party, 蛍 light intensity variations に よ り, ホ ス ト ー ゲ ス の interaction between ト を 検 out で き れ ば, よ り, high sentaku, Gao Gan の 検 out が expect で き る. ま た, resin に を light through さ せ る absorbance measurement に し seaborne, resin が light を 発 す る 蛍 light で は, the foregoing の よ う な absorbance measurement の interstate の problem を consider せ ず に determination が で き る の で, よ り high-speed な ラ イ ブ ラ リ の constructs, and び ス ク リ ー ニ ン グ が may に な る. Youdaoplaceholder0 で で, resin-supported ペプチドに introduction する蛍 light pigment を 検 discussion を line った. Resin-supported ペプチドに introduces する蛍 photopigment と て, FITC(florescein-5-isotiocyanate)を selects 択 た. FITC ボ, カ ボ ボ, <s:1> acid プロト プロト, <s:1> dissociation によって蛍 light intensity が increase する蛍 light substance である. The へ at the N end of また and ペプチド is prone to be introduced into が, which can easily lead to the に exposure of える蛍 light ラベ and である chemical である. Bear with FITC を resin type ペ プ チ ド (Leu - Leu - Leu) に import し, マ イ ク ロ ブ レ ー ト リ ー ダ ー を with い て 蛍 light intensity measurement line を っ た. ア ミ ン concentration rights に with い 蛍 light intensity の raised plus が see ら れ た も の の, コ ン ト ロ ー ル resin と 蛍 light raised に requirement by big き な violations い は see ら れ な か っ た.

项目成果

中村 成夫: "試料の前処理ハンドブック 磁気ビーズ法"丸善 (中村洋監修). 4 (2003)

Shigeo Nakamura：“样品预处理手册磁珠法”Maruzen（Hiroshi Nakamura 监督）4 (2003)。

K.Ohe et al.: "Adsorption behaviors of 2-chlorophenol using chacoal and activated carbon prepared from bamboo"J. Chemical Industry and Engineering (China). 53 Suppl.. 116-117 (2002)

K.Ohe 等人：“利用竹炭和活性炭对 2-氯苯酚的吸附行为”J.

T.Fujita et al.: "Importance of Amino Acid Sequences in Recognition of Organic Amine by Lipophilic Tripeptides"Analytical Sciences. (in press). (2002)

T.Fujita 等人：“氨基酸序列在亲脂性三肽识别有机胺中的重要性”分析科学。

K.Ohe et al.: "Synthesis of glycidylmethacrylate-divinylbenzene polymer beads containing amino-alcohol groups their adsorption behaviors for boron"J. Chemical Industry and Engineering (China). 53 Suppl.. 304-305 (2002)

K.Ohe等：“含有氨基醇基团的甲基丙烯酸缩水甘油酯-二乙烯基苯聚合物珠的合成及其对硼的吸附行为”J。