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植物自身の遺伝子を利用した環境にやさしいウイルス抵抗性植物の作出

利用植物自身基因培育环境友好型抗病毒植物

基本信息

批准号：
13760035
负责人：
松下保彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

トマトモザイクウイルス(ToMV)の移行蛋白質(MP)に結合する蛋白質(MP-interacting protein : MIP)のcDNAとして,2種の転写コアクチベーターに相当するMIP102(BcKELP)とMIP204(NtMBF1)および新規遺伝子に相当するAtMIP105およびMIP106を単離し、各々のMP結合領域を明らかにした。抗ウイルス蛋白質としての有用性を調べる目的で、各々のMP結合領域を発現するプラスミドを、緑色蛍光蛋白質(GFP)をレポーターとするToMVの感染性DNAクローンと共に、パーティクルガン法によりNicotiana benthamianaの葉に導入した。GFPの蛍光の拡がりを指標として、ToMVの細胞間移行の様子を解析した結果、BcKELPを用いた場合にのみ、ウイルスの細胞間移行が阻害された。そこで、BcKELP及びNtMBF1のMP結合領域を過剰発現する形質転換タバコの作出を試み、それぞれ133個体及び35個体の形質転換体を得た。BcKELPのMP結合領域を発現する一部の形質転換体においては、ToMV感染後にウイルス接種葉及び非接種上位葉での外被蛋白質の蓄積が検出されず、導入遺伝子の影響によりウイルスの移行が阻害されたと考えられた。しかし、その次世代植物においては、個体間で導入遺伝子の発現にばらつきがあり、安定したウイルス抵抗性は認められなかった。NtMBF1の場合は、内在性のNtMBF1遺伝子の発現量が多く、非形質転換体よりも過剰発現している個体は得られなかった。逆に、NtMBF1の蓄積量が減少している個体が見つかったが、ToMVの細胞間及び全身移行には差が見られなかった。BcKELPの例は、導入形質の安定性という点が将来の課題として残るが、植物自身の遺伝子を利用して新しいタイプのウイルス抵抗性植物を作出する可能性を示すものとして注目される。

The cDNA of MP-interacting protein (MIP), a migrating protein (MP) of ToMV, is related to MIP102(BcKELP) and MIP204(NtMBF1), and to AtMIP105 and MIP106, respectively. The purpose of regulating the usefulness of anti-virus proteins is to develop the expression of MP-binding domains, green fluorescent protein (GFP), infectious DNA of ToMV, and the introduction of Nicotiana benthamiana leaves. GFP's fluorescence index, ToMV's cell-to-cell migration analysis results, BcKELP's application in the case of fluorescence, its cell-to-cell migration inhibition The MP binding domain of BcKELP and NtMBF1 was found to be the first to be transformed into a physical entity, and 133 individuals and 35 individuals were transformed into physical entities. The MP binding domain of BcKELP was found to be a part of the morphological transformation of the host cells. The accumulation of coat proteins in the inoculated leaves and non-inoculated upper leaves after ToMV infection was detected. The effects of introduced genes on the migration of the host cells were examined. In the next generation, the plant is resistant to infection, stable and resistant to infection. NtMBF1 is not only the case, but also the intrinsic NtMBF1 gene. The accumulation of NtMBF1 decreases in reverse direction, and decreases in individual, intercellular and systemic migration of ToMV. The BcKELP example shows the possibility of introducing new and resistant plants into the stability of their properties and future problems.