大豆アレルゲンGly m Bd 28Kの糖鎖構造とアレルゲン性の関連性

大豆过敏原Gly m Bd 28K糖链结构与致敏性的关系

• 批准号: 13760107
• 负责人: 比江森 美樹
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Okayama Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760107/
• 关键词: 大豆アレルゲン; Gly m Bd 28K; アスパラギン結合型糖鎖; 糖鎖構造; IgE抗体

大豆アレルゲンGly m Bd 28Kはアスパラギン結合型糖鎖を有する糖タンパク質である。これまでの研究過程で、Gly m Bd 28Kのアレルゲン性にはその糖鎖が関与していることを示唆してきた。そこで本研究では、そのアスパラギン結合型糖鎖の構造とアレルゲン性の関連性を明らかにするために、まず、本アレルゲンの糖鎖構造解析を行った。さらに、大豆アレルギー患者血清中のIgE抗体との結合性について単糖レベルでの解明を試みたので以下にその成果について報告する。1、平成13年度に脱脂大豆より精製した本アレルゲンから、ヒドラジン分解によりアスパラギン結合型糖鎖を切り出し、N-アセチル化後、得られた糖鎖を2-アミノピリジン(PA)にて標識し、蛍光法によりHPLCを用いてPA化糖鎖を単離した。HPLCによる二次元マップにおけるスタンダードの糖鎖との比較、及び各種グリコシダーゼ消化並びにMS、MS/MS分析により、Gly m Bd 28Kの糖鎖構造は、Man_3Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2が主要構造であり、さらに、Man_3Xyl_1GlcNAc_2及びMan_4Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2の構造も存在することが明らかになった。2、1にて決定された糖鎖構造をもとに、大豆アレルギー患者血清中のIgE抗体と反応する糖鎖構造を検討するために、上記PA化糖鎖をフコシダーゼ及びキシロシダーゼ処理し、HPLCにより種々の構造の糖鎖を調製した。現在、それら糖鎖を用いて血清中のIgE抗体との結合性を比較検討中である。以上の結果から、Gly m Bd 28Kの糖鎖構造はXylやFuc残基を有する典型的な複合型であることが確認された。また、これまで報告のない糖鎖構造として、Man_4Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2構造が検出された。現在、それら糖鎖構造の情報をもとに単糖レベルでのIgE抗体との結合性を検討中であり、その成果は臨床検査や治療における有効な手掛かりとなることが期待できる。

Glycine max Bd 28K is a sugar chain. This research process, Gly m Bd 28K and the nature of the sugar lock, and the relationship between them. In this study, we analyzed the structure and relationship of sugar chain in combination with sugar chain in order to clarify the relationship between sugar chain and sugar chain. In addition, IgE antibodies and binding properties in serum from patients with soybean allergy were reported in the following results: 1. Defatted soybean was purified in 2013, and then purified by HPLC. After N-decarboxylation, the 2-decarboxylation (PA) was obtained, and then purified by HPLC. HPLC analysis showed that there were two main structures, one was Glym Bd28K, the other was Man_3Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2, the other was Man_3Xyl_1GlcNAc_2 and the other was Man_4Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2. 2. To determine the structure of the carbohydrate chain, to study the structure of the carbohydrate chain in the serum of the soybean, to record the structure of the carbohydrate chain in the serum of the soybean, and to modulate the structure of the carbohydrate chain in the serum of the soybean. Now, we have a comparative study of IgE antibodies in serum. These results confirm that the glycan structure of Glym Bd28K contains both Xyl and Fuc residues. The structure of Man_4Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2 was found. Now, the information on glycan structure is available in the study of IgE antibody binding, and the results of clinical investigation and treatment are expected.

项目成果

H.Tsuji, M.Hiemori, et al.: "Allergenicity of a soybean allergen, Gly m Bd 28K"Soy Protein Research, Japan. 第4巻. 39-44 (2001)

H. Tsuji、M. Hiemori 等人：“大豆过敏原 Gly m Bd 28K 的过敏性”，大豆蛋白研究，日本，第 4 卷，39-44 (2001)。

H.Tsuji, M.Hiemori, et al.: "Cloning of cDNA encoding a soybean allergen, Gly m Bd 28K"Biochim. Biophys. Acta. 第1518巻. 178-182 (2001)

H.Tsuji，M.Hiemori 等人：“编码大豆过敏原，Gly m Bd 28K 的 cDNA 的克隆”Biochim. 1518. 178-182 (2001)。

H.Tsuji, M.Hiemori et al.: "Metabolism of the precursor of Gly m Bd 28K, a major soybean allergen in growing soybean seeds"Soy Protein Research, Japan. Vol.5. 17-20 (2002)

H.Tsuji、M.Hiemori 等人：“Gly m Bd 28K 前体的代谢，生长大豆种子中的主要大豆过敏原”大豆蛋白研究中心，日本。