脱髄疾患モデルdmyラットにおける脱髄メカニズムの解明:オリゴデンドロサイト動態の追跡

阐明脱髓鞘疾病模型 dmy 大鼠的脱髓鞘机制：追踪少突胶质细胞动态

• 批准号: 13760222
• 负责人: 桑村 充
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka Prefecture University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760222/
• 关键词: 脱髄; 髄鞘崩壊; ミエリン形成; ミュータント; 動物モデル; オリゴデンドロサイト; 病態解析; ラット

免疫組織化学2、4、6、7、8週齢のホモ型個体および同腹非発症型個体の脊髄を採材し、ED1(浸潤マクロファージ)、Glial fibrillary acidic protein(GFAP、アストロサイト)、Myelin oligodendrocyte glycoprotein(MOG、ミエリン)、2',3'-cyclic nucleotide-3'-phosphodiesterase(CNPase、オリゴデンドロサイト)、Golgi 58k(ゴルジ装置)、Ubiquitin(変性蛋白)、Proliferating cell nuclear antigen(増殖細胞)に対する抗体を用いて免疫組織化学的に解析した。さらに胸髄白質のCNPase陽性細胞数およびED1陽性細胞数の計測を行った。dmyラットでは、2週齢でMOGの染色性が低下し、7、8週齢ではMOGおよびCNPaseの染色性が低下した。2週齢dmyラットのCNPase陽性細胞数は、対照ラットに比較して少数で、4週齢で増加し、7週齢で再度減数していた。病変の進行した個体ではアストロサイトの腫大やED1陽性細胞数の有意な増加が見られ、二次的な反応と考えられた。白質空胞病変部に一致して腫大した細胞質を持つ細胞が存在し、この細胞はED1、GFAPに陰性、CNPase陽性を示し、オリゴデンドロサイトと同定された。さらにその細胞質はGolgi 58k陰性で、Ubiquitin陽性の所見が得られたことから、退行性変化が示唆された。In situ hybridization : Proteolipid protein(PLP)mRNAを認識するオリゴプローブを用いて解析した。dmyラットでは、対照ラットに比較してPLP mRNAの発現が弱く、オリゴデンドロサイトの機能低下が示唆された。PLP mRNAシグナルは腫大オリゴデンドロサイトでも確認された。電顕的に腫大オリゴデンドロサイト内には多数のミトコンドリアや小胞体様の膜構造が観察された。dmy遺伝子はオリゴデンドロサイトの分化・成熟に関係していると考えられ、dmyラットはミエリン形成や維持機構の解明に重要な動物モデルになると考えられた。

Immunohistochemistry at 2, 4, 6, 7, and 8 weeks 齢 <s:1> ホモ type ホモ individuals および and abdominal non-invasive type <s:1> spinal cord を samples were collected for <s:1>, ED1(infiltration of <s:1> ロファ ロファ ジ ジ ジ ジ ジ), Glial fibrillary acidic protein(GFAP, アストロサ <s:1> ト), and Myelin oligodendrocyte glycoprotein(MOG, <s:1> エリ <e:1>), 2',3'-cyclic nucleotitide -3'-phosphodiesterase(CNPase, リゴデ ドロサ ト), Golgi 58k(ゴ ジ ジ ジ device), Ubiquitin(variable protein), Proliferating cell nuclear antigen(proliferating cell)に against する antibody を use に immunohistochemical analysis of <s:1> て た for た. Youdaoplaceholder0 the number of CNPase positive cells in the white matter of the thoracic gland および the number of ED1 positive cells <s:1> measure を rows った. Dmy ラ ッ ト で は, 2 weeks 齢 で MOG の dyeing が low し, 7, 8 weeks 齢 で は MOG お よ び CNPase の dyeing が low し た. 2 weeks 齢 dmy ラ ッ ト の CNPase positive cells number は, polices according to ラ ッ ト に compare し て a few で, 4 weeks 齢 で raised し, 7 weeks 齢 で reduction again し て い た. Disease - の for し た individual で は ア ス ト ロ サ イ ト の swelling や ED1 positive cells number の intentionally な raised plus が see ら れ, secondary な anti 応 と exam え ら れ た. White matter consistent with variations of に empty cell し て swelling し た cytoplasm つ cells が existence を し, こ の cells は ED1, GFAP に negative and positive CNPase を し, オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト と with fixed さ れ た. さ ら に そ の cytoplasm は Golgi 58 k negative で, Ubiquitin positive が の see ら れ た こ と か ら, degenerative - が in stopping さ れ た. In situ hybridization: Proteolipid protein(PLP)mRNAを Understanding する リゴプロ リゴプロ ブを ブを Using て て analysis of <s:1> た. Dmy ラ ッ ト で は, polices according to ラ ッ ト に compare し て PLP mRNA の 発 が weak く, オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト の function low が in stopping さ れ た. PLP mRNAシグナ トで <s:1> シグナ swelling and リゴデ ドロサ ドロサ トで トで トで confirm された. Electric 顕 に swelling オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト within に は most の ミ ト コ ン ド リ ア や small cell body others の membrane structure が 観 examine さ れ た. Dmy posthumous son 伝 は オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト の, mature に masato is し て い る と exam え ら れ, dmy ラ ッ ト は ミ エ リ や form ン institutions の interpret に important な animal モ デ ル に な る と exam え ら れ た.