ラット膵炎モデルにおける膵腺房細胞内NF-κB活性化メカニズムに関する研究

大鼠胰腺炎模型胰腺腺泡细胞NF-κB激活机制研究

• 批准号: 13770252
• 负责人: 丹藤 雄介
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770252/
• 关键词: 膵腺房細胞; タンパク分解酵素; NF-κB; 分子生物学; JNK; p38; 膵線房細胞

高濃度CCK刺激ラット膵腺房細胞初代培養系(実験的急性膵炎モデル)を用いて、培養液中へのタンパク分解酵素阻害剤添加(gabexate mesilate、nafamostat mesilate、Pefabloc)による膵腺房細胞内トリプシン活性阻害効果、膵腺房細胞内AP-1遺伝子発現シグナルを検討した。100nMCCK刺激によって、膵腺房細胞内トリプシン活性化(細胞内TAP濃度の増加)が生じた。Nafamostat mesilate、gabexate mesilate, Pefablocは用量依存性にトリプシン活性を阻害した。一方、膵腺房細胞内でのAP-1遺伝子発現については,本年度の研究ではJNK (c-Jun N-terminal kinase)の活性化およびp38の発現をwestern blot法で観察した。100nM CCK刺激直後からのJNK, p38の誘導が観察された。このJNK, p38の誘導は膵腺房細胞のTNF-αによる刺激でも同様に観察された。しかし,Nafamostat mesilate、gabexate mesilate, Pefablocは膵腺房細胞におけるJNK, p38の誘導を阻害しなかった。以上より、高濃度CCKによって生じる腺房細胞内でのトリプシン活性化はIκBキナーゼの活性化を生じさせることによって、NF-κBの活性化を起こしているが(平成13年度報告)、JNKを介するAP-1誘導シグナルには関与していないことが示唆された(平成14年度報告)。CCK刺激実験的急性膵炎モデルにおける,細胞内のいわゆるearly eventでは,細胞内酵素活性化シグナルと炎症反応シグナルのクロストークが存在するが,アポトーシス誘導に関しては細胞内酵素活性化を介さない,高濃度CCK刺激によって活性化される,他のシグナル伝達系路の存在が考えられる。

High-concentration CCK stimulation of the primary culture line of ラット膵 adenocarcinoma cells (acute 膵 inflammation of the laboratory モデ を)を use of へ て, へ, タ, パ パ in the culture medium, and addition of <s:1> enzyme inhibitor (gabexate mesilate, nafamostat) mesilate, Pefabloc) トリプシ <s:1> inhibitory effect on the activity of トリプシ in による膵 adenocompartment cells, 伝 manifestation of AP-1 in 膵 adenocompartment cells, シグナ を検 を検 and た. 100nm MCCK stimulation of によって and 膵 adenocarcinoma cells causes トリプシ <s:1> activation (<s:1> increase in intracellular TAP concentration)が to generate じた. Nafamostat mesilate, gabexate mesilate, Pefabloc <s:1> dosage dependence にトリプシ <s:1> activity を inhibition た た. Party, Cui gland cells で の AP - 1 heritage 伝 son 発 now に つ い て は, this year's の research で は JNK (c - Jun N - terminal kinase) の activeness お よ び p38 lightning の 発 を now western blot method で 観 examine し た. 100nM CCK stimulation of the posterior ら ら <s:1> JNK, p38 <s:1> induction of が観 examination された. <s:1> <s:1> JNK, p38 <s:1> induces 膵 膵 adenoatrial cells <s:1> TNF-αによる stimulates で 膵 similar に観 observe された. <s:1> 膵,Nafamostat mesilate, gabexate mesilate, Pefabloc 膵 膵 adenoatrial cells におけるJNK, p38 <s:1> induction を inhibition of <s:1> な った った った. Above よ り, high concentration of CCK に よ っ て raw じ で room る gland cell の ト リ プ シ ン activeness は I kappa B predominate キ ナ ー ゼ の activeness を raw じ さ せ る こ と に よ っ て, nf-kappa B の activeness を up こ し て い る が (pp.47-53 13 annual report), JNK を interface す る AP - 1 induced シ グ ナ ル に は masato and し て い な い こ と が in stopping さ れ た (Heisei 14 Annual Report) Acute 膵 inflammation of CCK stimulation experiment モデ わゆる における, intracellular <s:1> わゆる わゆるearly Event で は, intracellular enzyme activeness シ グ ナ ル と anti inflammation 応 シ グ ナ ル の ク ロ ス ト ー ク が exist す る が, ア ポ ト ー シ ス induced に masato し て は intracellular enzyme activeness を interface さ な い, high concentration of CCK stimulus に よ っ て activeness さ れ る, he の シ グ ナ ル 伝 exist of road is の が exam え ら れ る.